山栀茶抗抑郁活性部位及其化学成分研究

来源 :中国人民解放军军事医学科学院 | 被引量 : 5次 | 上传用户:catche
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抑郁症(depression)是一种以显著而持久的心境低落为主要临床特征的综合症,严重者甚至出现自杀等极端自残的行为,已成为严重威胁了人类身心健康的世界致残性疾病,目前治疗主要以化学药物为主,常用抗抑郁药物多存在耐药性和不良反应,因此从中药和天然药物中发现抗抑郁中药和活性成分具有重要的理论意义和应用价值。山栀茶(Radix Pittospori)系海桐花科海桐花属植物莽草海桐(Pittosporum illicioides Makino)的干燥根,主要分布于我国西南及陕西南部、浙江、福建、台湾等地,主产贵州,植物资源丰富。77版《中国药典》记载:山栀茶具有镇静、降血压功效,用于神经衰弱,失眠多梦,高血压症;《中药大辞典》记载有活络止痛、宁心益肾功效。山栀茶为安神类中药,在贵州民间(苗族)多用于治疗神经衰弱,是贵州少数民族用药。本课题拟对山栀茶药理活性和化学成分进行研究,为寻找其活性成分,扩大临床应用范围,有效控制山栀茶药材质量,创制中药新药,充分利用药材资源和开发民族用药提供科学依据。中医治疗抑郁症以养心安神、补益心脾、滋补肝肾为主。山栀茶虽有镇静、宁心安神功效,但有关山栀茶抗抑郁药效考察及其活性成分的研究尚未见报道,值得进一步研究与开发。因山栀茶常用提取工艺为水煎法和醇沉法,故本研究首先对山栀茶水提物和醇提物进行抗抑郁试验,抑郁模型为慢性不可预见性刺激应激模型,采用小鼠强迫游泳运动实验和悬尾实验来观察山栀茶抗抑郁试验效果,结果显示:山栀茶的水提物和醇提物能显著缩短小鼠悬尾试验和强迫游泳试验的不动时间,有明显抗抑郁作用,两者作用与抗抑郁药氟西汀相当。为了进一步寻找山栀茶的活性部位,本课题先用溶剂萃取法把醇提物分为石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇等4个部位,采用小鼠悬尾实验和强迫游泳运动实验为方法,以小鼠持续不动时间为指标评价各部位的抗抑郁药理活性,结果显示:山栀茶4个不同极性部位均不同程度地缩短绝望模型中小鼠悬尾和强迫游泳的不动时间。其中以乙酸乙酯部位和正丁醇部位最为显著,即山栀茶抗抑郁活性成分主要分布在乙酸乙酯部位和正丁醇部位。为了系统地了解山栀茶的化学成分和活性成分,本课题先后用95%乙醇和70%乙醇对山栀茶进行提取,再通过不同极性溶剂对醇提物进行系统分离,以活性追踪为指导,对山栀茶抗抑郁活性部位(乙酸乙酯部位和正丁醇部位)采用硅胶、AB-8大孔树脂、sephadex LH-20凝胶、ODS等柱层析纯化,共分离到27个单体化合物,经理化常数测定及光谱分析(如UV、IR、NMR、MS,特别是二维核磁共振谱图的应用)等手段,鉴定了其中20个化合物结构,其中4个蒽醌类化合物,4个木脂素,4个三萜及其苷类,2个香豆素,2个脂肪酸,1个苯酞类化合物,1个萘酸酯,1个甾醇和1个芳香酸。在这些化合物中,3个为新化合物,分别为:(S)-4,7-二甲氧基-3-乙基苯酞((S)-3-ethyl-4,7-dimethoxyphthalide,4),3-氧基-20-脱甲异木油树-14(15)-烯-28,30-二酸(3-oxo-20-demethylisoaleuritolic-14(15)-ene-28,30-dioic acid,6),22-乙酰基-21-(2-乙酰氧基-2-甲基丁酰基)-R1-玉蕊醇(21-(2-acetoxy-2-methylbutanoyl)-22-acetyl-R1-barrigenol,11);1个为新天然产物即4,4-二甲基庚二酸(4,4-dimethyl--heptanedioic acid,8)。16个已知化合物分别鉴定为:大叶茜草素(mollugin,1)、硬脂酸(stearic acid,2)、豆甾醇(stigmasterol,3)、6,7-二甲氧基香豆素(6,7-dimethoxycoumarin,5)、7-羟基-6-甲氧基香豆素(7-hydroxy-6-methoxycoumarin,7)、1,3-二羟基蒽醌(1,3-dihydroxy-9,10-anthraquinone,9)、3α-羟基-20-脱甲异木油树-14(15)-烯-28,30-二酸(3α-hydroxyl-20-demethylisoaleuritolic-14(15)-ene-28,30-dioic acid,10)、丁香酸(syringic acid,12)、浙贝素即2-(3’,5’-二甲氧基-4’-羟苯基)-3,7-二氧杂环[3,3,O]辛酮-6(zhebeiresinol or2-(3’,5’-dimethoxy-4’-hydroxyphenyl)-3,7-dioxabicyclo[3,3,O]octan-6-one,13)、丁香脂素(syringaresinol,14)、丁香脂醇双葡萄糖苷(syringaresinol-4’,4’-O-bis-β-D-glucoside,15)、1,3,6-三羟基-2-甲基蒽醌(2-methyl-1,3,6-trihydroxy-9,10-anthraquinone,16)、8-O-4/8-O-4-脱氢阿魏酸三聚体(8-O-4/8-O-4-dehydrotriferulic acid,17)、1,3,6-三羟基-2-甲基蒽醌-3-O-α-鼠李糖(1→2)-β-D-(6’-O-乙酰基)葡萄糖苷(2-methyl-1,3,6-trihydroxy-9,10-anthraquinone-3-O-α-rhamnosyl(1→2)-β-D-(6’-O-acetyl)glucoside,18)、1,3,6-三羟基-2-甲基蒽醌-3-O-α-鼠李糖(1→2)-β-D-葡萄糖苷(2-methyl-1,3,6-trihydroxy-9,10-anthraquinone-3-O-α-rhamnosyl(1→2)-β-D-glucoside,19)、22-乙酰基-21-(2-乙酰氧基-2-甲基丁酰基)-R1-玉蕊醇-3-O-β-D-葡萄糖-(1→2)-α-L-阿拉伯糖(1→3)-β-D-葡萄糖醛酸苷(3-O-{β-D-glucopyranosyl-(1→2)-[α-L-arabinopyranosyl-(1→3)]-β-D-glcuronopyranosyl-(1→)}-21-(2-acetoxy-2-methylbutyryl)-22-acetyl-R1-barrigenol,20)。化合物1、7、9、10、13、16-19共9个为首次从该属植物中获得,化合物20为首次从该植物中获得。
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