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目的:探究齐墩果酸(OA)对血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖作用以及FGF2、JNK、PON2表达的影响,验证OA经FGF2/JNK/PON2信号通路抑制ox-LDL诱导的VSMCs增殖。方法:以VSMCs为受试对象,复制ox-LDL诱导的VSMCs增殖模型,实验设计分组为:正常组、模型组、OA低中高浓度组(7.5μM、15μM、30μM),OA与VSMCs共孵育12 h后,除正常组外均加ox-LDL作用24 h,CCK-8检测各组细胞增殖率,RT-PCR检测加入ox-LDL不同时间点(0,6,12,24,48 h)后VSMCs中FGF2、JNK、PON2的m RNA经时变化,Western Blot和RT-PCR检测5组细胞中FGF2、JNK、PON2蛋白和m RNA表达水平,NO检测试剂盒检测各组细胞内NO的含量。应用Stealth si RNA干扰技术,验证级联通路的上下游关系,分组:ox-LDL模型组、ox-LDL+si-FGF2组、OA组(30μM)、OA+si-FGF2组、OA+FGF拮抗剂SU5402组、OA+JNK抑制剂SP600125组,Western Blot检测基因沉默效率和相关蛋白表达,并用SPSS 17.0进行统计分析。结果:50μg/ml ox-LDL成功诱导VSMCs增殖,OA孵育12 h后较模型组增殖率显著降低且呈剂量依赖性方式(p<0.05);ox-LDL+si-FGF2组增殖率较模型组降低,OA+si-FGF2较OA组下降(p<0.05),表明FGF2可能与VSMCs增殖呈正相关,且随着FGF2表达减弱,OA的抗增殖活性升高;在OA组中加入抑制剂SU5402和SP600125后VSMCs增殖率均降低,表明FGF2、JNK与VSMCs增殖有关。RT-PCR结果显示:加入ox-LDL后细胞内FGF2 m RNA经时表达较0 h显著升高(p<0.05),而PON2表达下降(p<0.05),提示两者表达呈负相关。RT-PCR和Western Blot检测结果可知:模型组中JNK磷酸化水平、FGF2的m RNA和蛋白水平较正常组均上升(p<0.05),而PON2 m RNA和蛋白表达降低(p<0.05);与模型组比较,OA组JNK磷酸化水平、FGF2 m RNA和蛋白表达量均下降(p<0.05),PON2表达水平升高(p<0.05),随着OA浓度的增加趋势越明显,呈剂量依赖性关系。FGF2、PON2在m RNA表达水平与蛋白表达一致,而JNK m RNA表达无明显变化,表明p-JNK是JNK的活性表达形式,提示OA可通过下调FGF2和p-JNK、上调PON2的表达来抑制ox-LDL诱导的VSMCs增殖。使用脂质体转染和抑制剂SU5402将FGF2沉默和抑制后,Western Blot检测相关蛋白表达,结果可知JNK磷酸化表达明显降低(p<0.05),表明FGF2可调控JNK的磷酸化,OA经FGF2抑制JNK的表达;加入JNK特异性抑制剂SP600125后,PON2的蛋白表达水平明显升高(p<0.05),表明PON2受上游分子JNK的调控,OA可通过抑制JNK的表达调控PON2。与正常组相比,模型组中细胞内NO水平降低(p<0.05),OA低中高药物组较模型组中NO含量上升(p<0.05),且与浓度呈正相关,提示OA可通过激活NO水平抑制VSMCs增殖。结论:50μg/ml ox-LDL显著促进VSMCs增殖,FGF2、JNK参与平滑肌细胞增殖,而PON2抑制其增殖。OA可通过调控FGF2/JNK/PON2信号通路抑制ox-LDL诱导的VSMCs异常增殖。