高致病性禽流感病毒（Avian Influenza Virus, AIV）H5N1亚型自1997年香港爆发后重挫全球经济，威胁公众健康。AIV H5N1的高致病性和高变异性给疫苗的研制和应用带来极大的困难。为此，研制能够提高宿主整体免疫力、抵御交叉感染和延长保护时间的禽流感疫苗佐剂显得相当有意义。益生菌基因组DNA作为新型核酸佐剂具有提高疫苗效力的潜力，因此有着巨大的研发价值。本研究选用多种益生菌，提取其基因组DNA作为AIV H5N1油乳苗的佐剂，并首次比较致病菌基因组DNA和人工合成的CpG寡聚核苷酸（CpG ODN）的免疫佐剂性。分不同剂量、不同免疫途径从体液免疫、细胞免疫、细胞因子分泌等多方面探讨其作为免疫佐剂的效果，以期找到能够较好提高AIV H5N1油乳苗效力的核酸佐剂及其递呈方式。实验结果表明：无论是益生菌基因组DNA（粪链球菌、嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌、双歧杆菌、屎链球菌），致病菌基因组DNA（革兰氏阴性菌大肠杆菌和革兰氏阳性金黄色葡萄球菌），还是合成的CpG ODN与AIV油乳苗同位点先后注射免疫时，血凝抑制（HI）效价均被严重削弱，而淋巴细胞活性、巨噬细胞吞噬活性和血清IFN-γ和IL-10浓度却略有提高。当益生菌粪链球菌FQ68基因组DNA，致病菌大肠杆菌和金黄色葡萄球菌基因组DNA及CpG ODN油裹于AIV油乳苗内后再行注射免疫时，CpG ODN和FQ68基因组能提高HI效价、血清IgG效价和血清IFN-γ浓度，而降低血清IL-10浓度，其中CpG ODN免疫佐剂性较FQ68基因组明显,而致病菌大肠杆菌和金黄色葡萄球菌基因组DNA对AIV油乳苗的免疫佐剂性较差。结论显示，基于核酸佐剂和疫苗在动物体内递呈方式的差异所导致免疫效果的不同：如果核酸佐剂在免疫时游离于疫苗抗原，其表现出的免疫佐剂性较差，而当核酸佐剂油裹于油乳苗内再行免疫，CpG ODN和益生菌基因组DNA均能提高体液和Th1型免疫应答水平，且CpG ODN免疫佐剂性好于天然细菌基因组DNA。本研究同时还得出CpG基序在动物模型鸡上也能诱导Th1型免疫应答，改变了传统疫苗诱导机体应答方式的初步结论。