黄瓜花叶病毒香蕉株系的衣壳蛋白基因转化烟草的研究

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采用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的叶盘转化法,将黄瓜花叶病毒香蕉株系(CMV-BS)的衣壳蛋白(CP)基因转入广东烤烟栽培品种G28和K326,获得了再生转基因烟株313株.转化体叶片在卡那霉素(Km)100μg/ml浓度下能分化形成愈伤组织,表明Km抗性标记基因(NPTⅡ)已转入烤烟烟株.用PCR检测和DAS-ELISA分析,结果进一步证明:CMV-BS CP基因已整合到转化烟株的染色体中,并得到不同程度的表达.利用广东地区香蕉、烟草和番茄上的CMV-BS株系、CMV-27株系和CMV-37株系,采用机械磨擦接种法和蚜虫传毒法进行攻毒试验,证明:表达CMV-BS CP基因的烟草植株对这三个株系的攻击都表现出明显的抗病能力,抗病性主要表现为延迟发病和症状的减轻方面,其抗性程度与烟株中的CP表达量呈正相关关系.
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