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海参蒸煮灭酶过程中产生大量的海参加工液,其中含有几乎与海参相同的成分,而这些加工液一直被作为废液排放,既造成环境污染,又是一种资源浪费。若能将其中的有效成分提取利用,将会提高海参加工的附加值,增加企业利润,既具有经济价值又具有环保意义。本文从海参加工液中分离提取出多种有效成分,并对这些有效成分的结构、理化性质和生物活性进行了初步研究,为海参加工液的综合利用提供技术支撑。首先,采用乙醇/硫酸铵双水相盐析萃取技术对海参加工液中的多糖、黑色素和皂苷进行综合分离提取,并对其结构、理化性质和生物活性进行了初步研究。结果表明,海参皂苷和黑色素分别富集在乙醇/硫酸铵双水相的上相和下相,蛋白和多糖以固体形式分配在上下相之间。进一步用木瓜蛋白酶酶解固体中的蛋白,提取得到海参多糖,通过异染作用、红外光谱分析和硫酸基含量测定表明,海参加工液中的多糖与海参壁中的多糖没有明显差别。采用酸沉碱溶法进一步分离下相中的黑色素,该色素不溶于水、甲醇和乙醇,易溶于二甲基亚砜(DMSO)和0.5mol/LNaOH溶液,红外光谱分析显示海参黑色素与其他物种黑色素的结构相似。采用大孔吸附树脂分离上相中的皂苷,总皂苷对人早幼粒白血病细胞HL-60和组织细胞淋巴瘤细胞U937体外生长有明显的抑制作用,半数抑制浓度IC50分别为0.088μg/μL和0.172μg/μL。用加压硅胶柱层析纯化皂苷,得到一种纯度较高的皂苷单体。其次,用正己烷-醇-海参加工液双液相体系同步分离提取蛋白/多糖和皂苷,蛋白和多糖以固体形式分布在下相,皂苷和油脂被萃取到上相。考察不同醇浓度和正己烷用量对成相与蛋白、多糖和皂苷回收率的影响,发现蛋白和多糖的回收率没有明显的变化,而皂苷的得率随着醇浓度增加和正己烷用量的增加而增加;采用叔丁醇/正己烷体系,蛋白、多糖和皂苷的得率分别为93.11%、84.74%和93.57%,固体中蛋白和多糖的含量分别为45.53%和20.43%。测定干燥粉末中重金属含量,As和Hg的去除效果较好,达到国家检验标准,而Cd和Pb的去除效果有待进一步改进。