红曲色素作为微生物发酵生产的天然色素产物,具有无毒副作用、耐高温、优良的药用价值等优点,被广泛应用于食品着色和医药成分。至今,国内无红曲色素标准品的纯化工艺研究,国际上亦无统一认可的标准品,导致诸多研究受到了限制。本论文针对酯溶性红曲色素标准品的提取、分离纯化、分析测试和稳定性进行研究。1.提取：利用索氏提取法研究了正己烷、乙酸乙酯、甲醇、二氯甲烷四种不同溶剂对酯溶性红曲色素的提取率效果,得到了正己烷-乙酸乙酯(1+1)的混合溶液为最佳的提取溶剂。2.分离纯化：利用正相柱层析和反相制备液相色谱对酯溶性红曲色素进行分离纯化,优化红曲标准品研制的工艺流程。以220mm(L)×25mm(i.d)的玻璃层析柱湿法装填充Silicycle硅胶60,正己烷上样、9：1正己烷：乙酸乙酯淋洗、5：1洗脱橙色组分,然后用制备型液相色谱以OBDTM-Prep C18柱(150mm×19mm×5μm),梯度洗脱(0-10min,60%-25%水；20～21min,25%-5%水；25-30min,0%-60%水),流速为10ml/min,进样体积2000μl,进行分离纯化。将分离组分以正已烷重结晶,得到了质量数为382的红曲红素和质量数为354的红斑素两种标准品,得率分别为0.037%、0.067%。该制备工艺得率稳定、重现性良好。3.分析检测：采用液质联用检测两种色素的一级质谱图并分析数据纯度、通过1H核磁共振检测数据分析并与文献数据对比确定物质结构、分光光度法检测两种橙色素在300～500nm有吸收峰,最大波长为382nm、超高效液相色谱以XBridge TMC18柱(4.6 mm×150 mm×5μm),70%甲醇水等度淋洗,波长设置为最大吸收波长382nm,利用峰面积归一化法计算出红曲标准品的纯度为100%,同时又设置了370nm、354n、.320nm、410nm、465nm的检测波长检测五份样品,未发现其他杂质峰。实验研究出一套红曲色素标准品的质谱、紫外、核磁共振、全波长的分析谱图和检测方法。4.稳定性研究：避光措施下贮存30天,红曲红素和红斑素含量变化不变,自然光照下,红斑素稳定性不好。实验还研究了在棕色玻璃瓶避光、锡箔纸避光、单波长紫外光照射、自然光照射的红曲红素吸光度变化情况,试验结果表明,可见光比单波长的紫外光分解速度快,棕色玻璃避光效果要好于锡箔纸的避光效果,初步确定贮存条件。长期稳定性还有待进一步研究。本研究确立了红曲色素标准品的研制工艺,提供了红曲色素标准品纯化方法,并进行了稳定性试验。为红曲标准品的研制提供科学数据。