沙门氏菌电化学免疫传感器的构建及其在牛乳检测中的应用

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由致病菌引起的食物中毒案例频发,而其中很大部分是由沙门氏菌感染导致的。沙门氏菌不仅对公众的健康造成严重威胁,而且使全球食品生产和加工行业遭受难以估计的损失。快速、高效的致病菌检测技术是预防和缓解这些问题的有效策略。但现有的检测技术,如平板计数法、荧光免疫法等,不能够满足当下的检测需求。因此,为解决所面临的难题,建立一种快速、灵敏检测食品中的沙门氏菌的方法,对我国食品行业的发展尤为重要。电化学免疫传感器由于具有响应速度快、灵敏度高、操作简便等优势,近年来得到了很多致力于食品安全方向的研究人员的关注。本文基于石墨烯复合材料构建了两种用于检测沙门氏菌的非标记型电化学免疫传感器。主要开展的工作如下:(1)合成了四氧化三铁-石墨烯(Fe3O4-graphene)复合材料,并将其作为修饰玻碳电极(GCE)的材料。然后通过恒电位法在复合材料上聚合金纳米粒子(Au NPs),利用Au-NH2键将抗体修饰到电极上,制备出一种检测沙门氏菌的电化学免疫传感器。通过扫描电子显微镜(SEM)和循环伏安法(CV)对电极的修饰步骤进行表征,并对传感器制备的关键参数进行优化。在最佳的实验参数下,采用差分脉冲法(DPV)对构建的沙门氏菌免疫传感器的性能进行检测分析,并在实际牛乳样品中进行了验证。结果表明,该传感器对沙门氏菌的线性检测范围2.4×10~2~2.4×10~7CFU m L-1,检出限为2.4×10~2 CFU m L-1,并且表现出良好的特异性、重复性和稳定性。(2)合成了钴铁基金属有机框架-石墨烯(Co Fe-MOFs-graphene)复合材料,并将其作为修饰GCE的材料。然后通过恒电位法在复合材料上聚合Au NPs,利用Au NPs与抗体之间形成的Au-NH2键将抗体固定在电极上,制备出一种快速检测沙门氏菌的电化学免疫传感器。通过SEM、CV分别对复合材料的形貌和传感器的构建步骤进行表征,并对传感器制备的关键参数进行优化。采用DPV对构建的沙门氏菌免疫传感器的性能进行检测分析,并在实际牛乳样品中进行了验证。结果表明,在最优的实验参数下,该传感器对沙门氏菌的线性检测范围为2.4×10~2~2.4×10~8CFU m L-1,检出限为1.2×10~2 CFU m L-1,并且表现出良好的特异性、重复性和稳定性。
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