组蛋白H3K9甲基转移酶基因ZmSUVH2调控种子活力机理研究

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种子活力是衡量种子播种质量的重要指标,揭示种子活力差异的机理在指导高活力种子生产加工以及提高作物产量方面具有重要的理论指导意义和潜在的应用价值。前期研究发现,玉米果穗中部种子活力最高,上部种子活力最低,组蛋白H3K9甲基化在调控玉米果穗不同部位种子活力差异方面发挥了重要的作用。本文利用亚细胞定位、荧光定量RT-PCR、酵母双杂交等技术,对组蛋白H3K9甲基转移酶基因ZmSUVH2与种子活力之间的关系进行了进一步探究。主要研究结果如下:1.构建了玉米ZmSUVH2-YFP表达载体,通过PEG诱导转化玉米叶片原生质体进行瞬时表达,发现蛋白ZmSUVH2定位于细胞核。2.表达模式研究发现,ZmSUVH2的表达在叶片中最高,根部次之;种子中ZmSUVH2表达量是干种子最低,随着吸胀,表达量不断上升;在吸胀不同时间中,中部种子中组蛋白甲基转移酶基因ZmSUVH2表达量始终明显低于上部种子。3.功能鉴定表明,ZmSUVH2的低表达可提高种子活力。4.以吸胀不同时间的郑58种子为材料,构建了cDNA文库;用pGBKT7-ZmSUVH2诱饵载体筛选cDNA文库,发现100个蛋白与ZmSUVH2存在互作,GO富集分析和KEGG分析表明,部分参与蛋白质降解和氨基酸合成的蛋白与ZmSUVH2存在互作;对发现的5个ZmSUVH2互作蛋白进行一对一验证,确认与其中3个蛋白存在互作,分别是Zm00001d002025(类AP2乙烯响应转录因子AIL5)、Zm00001d032422(12.5 kDa生长素胁迫蛋白)和Zm00001d031773(HVA22蛋白)。
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