组蛋白的乙酰化修饰参与介导有丝分裂中的多种染色质,具有十分重要的作用。在正常的受精和胚胎发育过程中,包括组蛋白乙酰化在内的各种基因表观修饰贯穿始终,有研究证实在受体卵母细胞中的供体细胞核的表观遗传重编程是不完全或者是异常的。为了探究组蛋白乙酰化与克隆胚胎发育的关系,进一步阐明克隆胚胎发育机理,从而改善克隆效率,本试验对组蛋白去乙酰化抑制剂(TSA)对延边黄牛重组胚发育的影响进行了系统和初步的探究。本研究应用了组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(trichostatin A),检测其不同浓度和不同作用时间对卵母细胞成熟及克隆胚发育的影响,得到的实验结果如下：在体外成熟培养液中添加不同浓度的TSA对延边黄牛A级卵母细胞体外成熟及体细胞克隆效率的影响的试验中,添加TSA浓度为50nmol/L的一组,卵母细胞成熟率无显著变化,但重组胚的卵裂率及囊胚发育率方面均显著高于其它浓度组(P<0.05),由此可见,成熟液中添加50nmol/L的TSA对促进重组胚发育作用最佳。在B级卵母细胞成熟液中添加不同浓度的TSA对卵母细胞体外成熟及体细胞克隆效率的影响的试验中,添加50nmol组的各指标均显著优于其他浓度(P<0.05),证明50nmol的TSA对提高质量较差卵母细胞的发育力上具有较好作用。在成熟液中添加浓度为50nmol/L的TSA处理不同时间,对延边黄牛卵母细胞体外成熟及体细胞克隆效率的影响的试验中,TSA作用22h组在重组胚的卵裂率和囊胚发育率方面均显著高于其它浓度组(P<0.05),即使用浓度为50nmol的TSA,作用时间22h为最适合于延边黄牛卵母细胞体外成熟及体细胞克隆的时间。在激活液中同添加不同浓度TSA对延边黄牛体细胞克隆效率影响的试验中,50nmol/L和75nmol/L组在重组胚的卵裂率方面高于其它各组,囊胚发育率上,50nmol/L显著高于其它组(P<0.05),可见TSA对重组胚激活阶段作用效果较显著,50nmol/L为最佳添加浓度。在核移植后早期培养液中添加不同浓度TSA对延边黄牛体细胞克隆效率影响的试验中,TSA对克隆重组胚的卵裂率和囊胚率影响均不显著,可见该阶段TSA无明显作用。在重组胚培养液中添加不同浓度的TSA对延边黄牛体细胞克隆效率的影响的实验中,添加50nmol/L组重组胚的卵裂率及囊胚发育率都显著高于其它各组(P<0.05),所以确定50nmol/L是最适于体细胞克隆的浓度。在重组胚培养液中添加浓度为50nmol/l的TSA作用不同时间,对延边黄牛体细胞克隆效率的影响的试验中,作用24h组在卵裂率,囊胚发育率方面都显著高于其它各组(P<0.05),所以确定24h是最适合于延边黄体细胞克隆TSA对重组胚的最佳作用时间。