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【研究背景与目的】手术应激会影响机体的各项正常生理机能,它会造成机体海马组织内氧化应激和凋亡水平增加,降低海马组织的神经发生能力。硫化氢(Hydrogen sulfide,H2S)在中枢神经系统疾病中具有神经保护作用。因此,本研究拟探讨H2S对术后老年大鼠海马组织的氧化应激、凋亡及神经发生的影响。【方法】Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠用异氟烷麻醉后行剖腹探查术,取大鼠海马组织,酶联免疫吸附实验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测丙二醛(Malondialdehyde,MDA),4-羟基壬烯醛(4-hydroxynonenal,4-HNE)和还原性谷胱甘肽(L-glutathione,GSH)含量;氮蓝四唑(Nitrotetrazolium blue chloride,NBT)方法检测超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)活力;Tunel染色检测大鼠海马CA1区细胞凋亡;Western blot方法检测Bcl-2,Bax,Cleaved caspase-3及Synapsin-1蛋白的表达;免疫组织化学技术(Immunohistochemistry,IHC)检测Doublecortin(DCX)、Minichromosome maintenance type 2(MCM2)和Synapsin-1的表达,免疫荧光技术(immunofluorescence,IF)检测NeuN+/Brd U+阳性细胞和GFAP+/BrdU+阳性细胞的表达情况。【结果】1.H2S拮抗术后老年大鼠海马组织氧化应激。给予大鼠NaHS(30,100μmol/kg,ip.)预处理14 d后,发现NaHS(100μmol/kg)明显减少了术后大鼠海马组织中MDA和4-HNE的含量并且增加了术后大鼠海马组织中GSH的含量和SOD的活力。以上结果表明,H2S减轻术后大鼠海马的氧化应激水平。2.H2S拮抗术后老年大鼠的海马组织神经细胞凋亡。给予大鼠NaHS(30,100μmol/kg,ip.)预处理14 d后,(1)Tunel染色结果显示NaHS(100μmol/kg)减少术后老年大鼠海马CA1区细胞凋亡;(2)Western blot检测结果显示,NaHS(100μmol/kg)显著增加术后老年大鼠海马组织中抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白的表达,减少促凋亡蛋白Bax和Cleaved caspase-3蛋白的表达。以上结果提示,H2S拮抗术后老年大鼠海马组织神经细胞凋亡。3.H2S拮抗术后老年大鼠海马组织的神经发生障碍。给予大鼠NaHS(30,100μmol/kg,ip.)预处理14 d后,(1)免疫组织化学法结果显示Na HS(100μmol/kg)明显上调了术后老年大鼠海马组织DG区MCM2和DCX的表达;(2)免疫荧光法结果显示,Na HS(100μmol/kg)增加了术后老年大鼠DG区NeuN+/BrdU+阳性细胞的表达,而对大鼠GFAP+/BrdU+的阳性细胞没有影响;(3)免疫组织化学法结果显示NaHS(100μmol/kg)明显增加了术后老年大鼠海马组织的Synapsin-1的表达,Western blot检测结果显示NaHS(100μmol/kg)明显提高术后老年大鼠海马内Synapsin-1蛋白的表达。上述结果说明,H2S改善术后老年大鼠海马组织的神经发生。【结论】H2S对术后老年大鼠的氧化应激和凋亡具有拮抗作用,对术后老年大鼠的神经发生有改善作用。