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近年来,上转换发光纳米粒子因其远远优于传统发光材料的光学特性,如窄的发射峰,高的信噪比,以及对生物组织良好的穿透性且不会对生物体产生较大的损害等,使得其在生物分析方面的应用越来越突出。根据以上所述上转换纳米材料的优点,本论文设计制备了具有红区发光的NaYF4:Yb,Er/NaGdF4核壳纳米粒子和在近红外区域发光的NaYF4:Yb,Tm/NaGdF4核壳纳米粒子,并应用甲胎蛋白抗体1(Ab1)对其进行生物偶联,用作供体。同时制备了具有相应纵向表面等离子体共振的金纳米棒,用作受体。基于发光能量转移技术,构建了对生物分子(甲胎蛋白)分析、检测的新体系。⑴应用水热合成法制备了光学性质稳定的红区发光NaYF4:Yb,Er纳米粒子,应用阳离子交换法制得NaYF4:Yb,Er/NaGdF4核壳纳米粒子并应用甲胎蛋白抗体1(Ab1)对其进行生物偶联。同时通过透射电镜、荧光仪等对其进行了表征。合成了纵向SPR谱带为672 nm的金纳米棒。利用金纳米棒对上转换材料的猝灭效应,建立了发光能量转移体系。又因为抗原与相应抗体之间的特异性识别,使得本体系可对甲胎蛋白(AFP)进行选择性检测。测定AFP的线性范围:0.089-22.88 ng/mL,检测限低至0.083 ng/mL。⑵合成具有高发光效率的近红外发光NaYF4:Yb,Tm/NaGdF4核壳纳米粒子并利用甲胎蛋白抗体1(Ab1)进行生物偶联,作为能量供体,带正电荷的金纳米棒为能量受体。由于二者之间的静电相互作用,使得供受体间的距离减小,基于此,NaYF4:Yb,Tm/NaGdF4-金纳米棒发光能量转移体系被建立。加入甲胎蛋白后,由于抗原与相应抗体之间的的特异性识别,体系供、受体之间的距离被拉大,发光能量转移受阻。因而建立了基于“turn-on”的竞争免疫分析近红外区测定AFP的新方法。测定AFP的线性范围:0.18-11.44 ng/mL,检测限为0.16ng/mL。⑶首先利用甲胎蛋白抗体1(Ab1)修饰NaYF4:Yb,Tm/Na GdF4核壳纳米粒子并将其作为能量供体,同时利用甲胎蛋白抗体2(Ab2)修饰纵向SPR谱带为790 nm的金纳米棒作为能量受体,建立了基于“turn-off”夹心结构的发光能量转移体系。测定AFP的线性范围:0.35-11.44 ng/mL,检测限为0.28 ng/mL。