颈淋巴阻滞对大鼠血脑屏障通透性的影响

来源 :泰山医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jingyu0722
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目的:探讨大鼠颈淋巴阻滞后大脑皮质、海马血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)通透性的变化及其可能的机制,并分析BBB通透性与脑水肿的相关性。方法:雄性Wistar大鼠(体重250~300g,195只)随机分为正常对照组、手术组和假手术组。手术组采用Casley-Smith法阻滞颈淋巴,假手术组只分离、暴露颈淋巴结和淋巴管。每组大鼠在术后1、3、5、7、14和21d观察下述各指标:干湿重法检测脑组织含水量的变化;脑组织伊文思蓝(Evens blue,EB)含量和电镜观察镧离子(La3+)示踪剂和BBB超微结构变化来分析不同时间点BBB通透性的变化;酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测血清中S-100B的浓度;免疫荧光法检测大脑皮质和海马基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达水平。结果:1.大脑皮质与海马的各相应时间点的各种检测指标变化是一致的。2.手术组和假手术组脑组织EB含量在术后1天升高,但与正常组比较没有统计学意义;手术组术后3、5、7天升高且与相应的假手术组和正常组相比有统计学意义(p<0.05);假手术组和手术组分别于术后第3天、14天恢复正常。3.电镜观察:手术组与假手术组各时间点的La3+的位置与正常组没有明显区别:La3+没出现在血管腔外。BBB超微结构仅在手术组观察到:血管内皮细胞胞饮小泡增多,基底膜、星形胶质细胞足突有轻度水肿;上述变化于术后第3天出现,第5天明显,第7天减轻。4.血清S-100B浓度在各组的变化没有统计学意义。5.MMP-9表达情况:手术组和假手术组在术后1天表达增强,但与正常组比较没有统计学意义;手术组有两个高峰:术后3天和14天且与相应的假手术组和正常组相比有统计学意义(p<0.05);假手术组和手术组分别于术后第3天、21天恢复正常。6.手术组和假手术组脑组织含水量术后1天升高,但与正常组比较没有统计学意义;手术组术后3、5、7天升高且与相应的假手术组和正常组相比有统计学意义(p<0.05);假手术组和手术组分别于第3天、14天恢复正常。7.脑组织EB含量变化与淋巴滞留性脑水肿(lymphostatic encephalopathy, LE)的脑组织含水量高度相关(大脑皮质、海马相关系数分别为:r=0.761,r=0.773),而MMP-9荧光强度与之没有相关关系,大脑皮质、海马相关系数分别为:r=-0.246(P=0.595),r=-0.175(P=0.707)。结论:本实验发现颈淋巴阻滞对BBB通透性没有影响。术后3、5天EB含量升高是因为血浆蛋白在脑内积蓄,提示生理状态下脑内的蛋白存在颅外的“淋巴”引流途径,象其他器官的淋巴影响广泛一样,“淋巴”引流途径是维持微环境稳定的重要因素;而EB含量与脑水肿的高度相关性,提示LE是间质性水肿。
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