研究背景:卵巢癌是常见的妇科恶性肿瘤之一,发病率仅次于子宫颈癌和子宫内膜癌,死亡率却位居榜首,其病因及发病机制尚未完全阐明,缺乏有效的早期诊断方法,多数患者确诊时已为晚期,预后不良。若能早期发现并确诊卵巢癌,将显著延长患者的生存和改善其预后,有着重要的临床意义。PNMA5是已被确认的肿瘤神经元抗原,其产生的相关神经副肿瘤综合症可能是一些隐匿性肿瘤的早期表现。研究认为,PNMA5在维持肝癌细胞恶性表型过程中起着重要的作用,可能是结肠癌患者预后不良的生物学标记。但也有研究认为,PNMA5促进了人宫颈癌细胞及乳腺癌细胞的凋亡信号。我们前期研究发现通过一系列的磷酸化作用,PNMA5对小鼠卵母细胞连续的减数分裂发挥了重要作用。然而,关于PNMA5与卵巢癌关系的研究国内外未见报道。研究目的:探讨PNMA5在上皮性卵巢癌发生、发展过程中的作用及其分子机制,为PNMA5应用于上皮性卵巢癌的早期诊断及作为新的治疗靶点提供理论与实验依据。研究方法:1、应用免疫组化法检测PNMA5在上皮性卵巢癌、卵巢良性肿瘤及正常卵巢组织中的表达,应用Western-Blot法检测PNMA5在卵巢癌细胞株HO8910及正常卵巢细胞株Moody中的表达。2、运用特异性PNMA5 siRNA转染有效敲降卵巢癌细胞株HO8910中PNMA5表达,采用CCK-8实验检测细胞增殖能力、流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡、细胞划痕实验检测细胞迁移能力、Transwell实验检测细胞侵袭能力、Mito Tracker和Rhod-Phalloidin染色检测细胞线粒体及微丝变化。3、应用Western-Blot及免疫荧光法检测Src→PNMA5→GSK-3β细胞信号通路。研究结果:1)PNMA5在上皮性卵巢癌组织中的表达显著高于卵巢良性肿瘤及正常卵巢组织,PNMA5在上皮性卵巢癌组织中的阳性表达与卵巢癌FIGO分期、组织学分级密切相关;2)PNMA5在卵巢癌细胞株HO8910的表达高于正常卵巢细胞株Moody;3)特异性siRNA转染可有效敲降卵巢癌细胞株HO8910中PNMA5的表达;4)PNMA5敲降可抑制HO8910细胞增殖能力、阻滞细胞周期从G1期进入S期,促进细胞早期凋亡,抑制HO8910细胞迁移、侵袭能力,导致线粒体在细胞内的异常分布和聚集,抑制细胞肌动蛋白聚合;5)PNMA5的磷酸化水平受Src磷酸化正向调控,PNMA5磷酸化正向调节下游GSK-3β信号通路。研究结论:1、PNMA5在上皮性卵巢癌的发生、发展中发挥着致癌基因的作用,有望成为上皮性卵巢癌的潜在治疗靶点;2、基因干扰可有效敲降卵巢癌细胞株HO8910中PNMA5表达,PNMA5敲降可显著影响卵巢癌细胞的恶性生物学行为;3、PNMA5可能通过Src→PNMA5→GSK-3β信号通路激活来促进上皮性卵巢癌的发生与发展。