【摘 要】
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家蚕（Bombyx mori）是昆虫第二大目鳞翅目的模式昆虫,具有重要经济、科研价值。其粘液腺（collterial gland）可分泌及储存具有很强粘着性的物质,这些物质能够固定及保护蚕卵。家蚕散卵性状主要是由于粘液腺发生突变后,分泌较少甚至不能分泌粘性物质。本研究以产天然散卵的H9和产胶着卵的P50为亲本,选择近似亲本极端性状的子代建立混池进行了BSA全基因组重测序,并将BSA重测序与H9和P
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家蚕（Bombyx mori）是昆虫第二大目鳞翅目的模式昆虫,具有重要经济、科研价值。其粘液腺（collterial gland）可分泌及储存具有很强粘着性的物质,这些物质能够固定及保护蚕卵。家蚕散卵性状主要是由于粘液腺发生突变后,分泌较少甚至不能分泌粘性物质。本研究以产天然散卵的H9和产胶着卵的P50为亲本,选择近似亲本极端性状的子代建立混池进行了BSA全基因组重测序,并将BSA重测序与H9和P50粘液腺的转录组测序进行了关联分析,以及对主要差异表达基因进行了研究。研究结果如下:1.对家蚕H9和P50及其子代进行BSA重测序,对SNP和In Del获得的关联区域取交集,通过BSA定位共得4个与性状相关的侯选区域,总长度为17.68 Mb,关联区域内共注释到基因437个。2.差异表达基因的GO注释分析:根据显著性KS值选取了富集程度最显著前10位功能对应的差异表达基因,差异基因集中在突触小泡、跨膜运输、突触蛋白等方面,且鉴定到大量几丁质和角质层蛋白基因;根据显著性Q值选取了KEGG通路中富集程度最显著的10个通路,差异基因主要与脂、糖代谢等相关,并与细胞吞噬等生命活动相关;COG注释分析表明这些差异基因可能与复制、重组、修复及信号转导相关。3.本研究分别从BSA重测序经过功能注释的候选基因、重测序与转录组分析的差异基因比对得到的基因中挑选了20个和17个差异基因,检测了这些基因在家蚕H9、P50粘液腺中的表达情况,并从中各选取了10个基因检测其在不同发育阶段的表达情况。结果表明大部分基因在H9、P50粘液腺中表达量都有较大差异,且在家蚕不同发育阶段中,部分基因表达量在家蚕发育五龄、蛹期、蛾期整体呈升高趋势。4.初步确定了两个相关候选基因:YKT6、STX16,并成功克隆和表达了目的基因,制备了多克隆抗体。各目的基因在H9、P50五龄三天各组织中及不同发育阶段的表达情况表明它们在各组织及各龄期中均有表达,但是表达量存在差异。目的基因在粘液腺不同发育时期的转录水平和蛋白水平的表达基本一致,但表达量也存在差异。通过对BSA重测序及BSA与转录组测序关联分析及散卵性状相关基因的筛选,为了解粘液腺发育及分泌机制提供了基础。
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