板栗（Castanea mollissima Bl.）是重要的木本粮食树种,也是典型的顽拗性种子,长期贮藏难度较大。为解析板栗种子顽拗性特征,提出有效贮藏技术,本研究以‘烟泉’板栗种子为试验材料,设置不同脱水和种子低温、胚方（切去部分子叶的种胚）超低温贮藏试验,测定不同含水量胚方的萌发率。同时,采用差示扫描量热（DSC）技术测定胚方的热力学参数;通过解剖学观察,研究不同含水量胚方显微结构及细胞中多糖、蛋白质和超微结构变化;利用同位素标记相对和绝对定量（i TRAQ）技术进行不同含水量胚方蛋白质组研究。研究结果表明:（1）板栗种子胚轴含水量高于子叶含水量,种子硅胶脱水效果优于自然脱水,胚方使用“干燥器+风扇”脱水效率高,16h可将胚方含水量降至11.8%。板栗胚方含水量从61%降至10%,萌发率从100%降至25.6%,表明板栗具有脱水敏感性。（2）差示扫描量热测定显示,随着板栗胚方含水量下降,结晶起始温度、峰值温度和热焓值均呈规律性下降,含水量降至20%及以下,无结晶峰出现。‘烟泉’板栗胚轴脱水临界含水量为23.9%。（3）解剖学研究结果显示,胚方含水量降至30%,细胞出现质壁分离;含水量降至10%,细胞质发生严重皱缩,并出现大量细胞降解。细胞中多糖和蛋白质随含水量降低呈现先聚集后降解的现象。细胞质严重皱缩和降解是板栗种子脱水伤害的重要原因。（4）同位素标记相对和绝对定量技术分析发现,不同含水量的胚方中,鉴定出5201个可信蛋白,其中912个差异蛋白。含水量降至30%,“过氧化物酶体”、“淀粉和蔗糖代谢”和“半乳糖代谢”受到显著影响,“过氧化物酶体”相关基因显著上调。含水量降至20%,“内质网蛋白质加工”受到显著影响,“核糖体蛋白质合成”相关基因显著上调,“内质网蛋白质加工”和“代谢途径”相关基因显著下调。含水量降至10%,分子功能的“结构分子活性”和“绑定”首次出现显著性差异,“代谢途径”相关基因显著下调,“核糖体蛋白质合成”相关基因显著上调。内质网蛋白质加工途径和核糖体蛋白质合成途径在板栗脱水过程中具有重要作用,较低的含水量会显著影响胚轴细胞的分子功能和代谢途径。（5）板栗种子在2℃低温密封环境中可贮藏12个月,其萌发率、胚根和胚芽长度均无显著差异。本研究中板栗种子萌发起始时间为3d,平均萌发时间（MGT）为6.3d。（6）不同超低温贮藏方法比较,玻璃化冷冻法（20.0%）和程序玻璃化冷冻法（25.8%）萌发率相对较高,说明使用玻璃化冷冻保护液PVS2可提高胚方超低温贮藏后的萌发率。经优化的超低温贮藏方法,可将胚方萌发率提高至60%。不同含水量胚方经过PVS2处理及超低温贮藏后,其热力学特征发生改变。基本培养基种类对组培分化率、出芽数、高度影响最大,本研究中‘烟泉’板栗幼苗组培较适宜培养基为DKW+2mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+0.04 mg/L IBA。本研究首次基于DSC技术研制了板栗脱水临界含水量测定方法,揭示‘烟泉’板栗胚方脱水临界含水量为23.9%;首次发现内质网蛋白质加工途径和核糖体蛋白质合成途径对顽拗性种子脱水具有重要响应,揭示了较低含水量会影响胚轴细胞分子功能;首次提出板栗种子脱水伤害形成机制。本研究结果为板栗种子顽拗性机理研究和科学贮藏提供了理论和技术参考。