【摘 要】
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目的结合上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)学说及肿瘤干细胞(cancer stem cells, CSCs)学说,研究人唾液腺腺样囊性癌肺高转移细胞系ACC-M细胞经TGF-
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目的结合上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)学说及肿瘤干细胞(cancer stem cells, CSCs)学说,研究人唾液腺腺样囊性癌肺高转移细胞系ACC-M细胞经TGF-β1诱导后的增殖情况及EMT与CSCs相关特殊标记物表达的相关性,并探讨其意义。方法(1)利用EdU (5-ethynyl-2’-deoxyuridine,5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷)标记技术,荧光显微镜下观察TGF-β1诱导前后ACC-M细胞中含有EdU的细胞数;(2)10ng/ml TGF-β1诱导培养ACC-M细胞,蛋白质印迹技术(Western blot)检测培养0h、12h、24h、48h、72h后ACC-M细胞EMT相关特殊标记物E-cad、N-cad、 Vimentin、MMP-2以及CSCs相关特殊标记物Bmi-1、Oct-4、 CD44、CD24表达的动态变化,并进行相关性分析。结果(1)诱导后含EdU的ACC-M细胞明显多于诱导前,且随培养时间延长数目逐渐增多,采用配对t检验对数据进行统计分析,P<0.05,差异具有统计学意义。(2)随TGF-β1诱导时间的延长,ACC-M细胞中E-cad、Oct-4、CD24表达逐渐降低;N-cad、 Vinmentin、MMP-2、Bmi-1、CD44表达逐渐增强。经统计学分析,EMT与CSCs相关特殊标记物的表达具有线性相关关系(P=0.000<0.05)。结论(1) TGF-β1能够在体外促进人唾液腺腺样囊性癌肺高转移细胞系ACC-M细胞的增殖;(2) TGF-β1诱导ACC-M细胞发生EMT的同时伴有CSCs相关特殊标记物表达的变化。
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