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对羟基苯甲酸酯类具有无色无味,广谱抗菌,pH稳定,成本低廉和相对安全等特点,目前被广泛应用到化妆品、食品和药品等,因此其暴露于环境越来越多,目前已在水体、土壤、灰尘、空气中检测到对羟基苯甲酸酯类。它已被鉴定为内分泌干扰物质(EDCs),具有雌激素和抗雄激素效应,影响生物体的发育、繁殖等。课题组之前的研究多以单酯对果蝇的影响,而本研究将对羟基苯甲酸甲酯(MP)和乙酯(EP)混合,果蝇连续三代暴露于MP+EP浓度组30Omg·L-1、70Omg·L-1、1000 mg·L-1和对照组,在生理水平上检测F1和F2果蝇羽化前发育周期、蛹化率、羽化率以及亲代和子代的繁殖力,在分子水平上检测F0、F1、F2未交配(Fn-0,n为代数、交配1 d(Fn-1)、3 d(Fn-3)和5 d(Fn-5)雌果蝇胰岛素/胰岛素样生长因子信号转导(ⅡS)通路和雷帕霉素靶标(TOR)通路相关基因dilp3、Foxo、AKH和S6K表达量,其中dilp3是Ⅱ通路的上游基因,Foxo是ⅡS通路的下游负调控基因,Foxo高表达会减弱ⅡS通路,使产卵量增加,AKH活化TOR通路,而S6K是TOR通路的下游基因。本研究得到的主要结论如下:(1)F1果蝇,100Omg·L-l MP+EP显著延长果蝇羽化前发育周期,而F2发育周期却比F1短,说明随着代数的增加,酯类的毒性降低,果蝇连续暴露MP+EP,其毒性并不是一直积累在体内,可能通过代谢途径把对羟基苯甲酸酯类排出,进而降低其毒性。(2)果蝇连续三代暴露MP+EP,F0果蝇的毒性最大导致其产卵量减少,并且产生某种记忆使F1和F2果蝇少摄入酯类,引起雌激素效应,导致产卵量增多。300 mg·L-1 F2的产卵量比对照组F2多,700 mg L-1和1000 mg·L-1的产卵量比对照组F2少,说明果蝇长期暴露300 mg L-1促进其产卵,700 mg L-1和1000 mg·L-1具有一定的毒性,导致其产卵量减少。(3)dilp3在F1中,30Omg·L·-1 F1-0、F1-3、F1-5的表达量均高于对照组,在F2中,700 mg·L-1和1000 mg L-1的表达量均比对照组低,说明300 mg·L-1促进了dilp3的表达,而700 mg·L-1和1000 mg·L-1对果蝇都有一定的毒性作用,会抑制dilp3的表达。(4)Foxo在300 mg·L-1浓度组F2-3和F2-5的表达量分别比F1-3和F1-5高,说明连续暴露于300 mg·L-1 MP+EP组,引起Foxo高表达。700 mg·L-1组F1-1和F2-5表达量分别低于F0-1和F1-5,而1000 mg·L-1组F1-1、F1-3、F2-5表达量均比F0-1、F0-3、F1-5低,说明果蝇长期暴露7000mg·L-1和1000 mg·L-1浓度组,导致Foxo表达受到抑制。(5)S6K在700 mg·L-1和1000 mg·L-1浓度组F2-1、F2-3和F2-5均呈现下调趋势,说明700 mg·L-1和1000 mg·L-1对果蝇S6K基因表达影响最大。(6)AKH在300 mg·L-1/F0-5、F1-0、F1-3、F1-5、F2-0和F2-5的表达量均比对照组高,说明300 mg·L-1促进AKH表达,而700 mg·L-1和1000 mg·L-1均比对照组低,呈下调趋势,说明700mgiL-1和100Omg·L-1抑制果蝇AKH的表达。综上所述,果蝇长期暴露于300mg·L·-1MP+EP表现出雌激素效应,使其产卵量增多,Foxo、AKH和S6K基因高表达,而果蝇长期暴露于700 mg L-1和1000 mg·L-1 MP+EP表现出一定的毒性,使其发育周期延长,产卵量比对照组少,dilp3、Foxo、AKH和S6K基因低表达,说明果蝇暴露于MP+EP,影响其生长、生殖、基因表达、紊乱ⅡS通路和TOR通路的调控,对羟基苯甲酸酯类的生殖毒性还需进一步深入探讨。