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本研究用Ca2+荧光探针Fura-2/AM对山羊卵巢卵母细胞体外成熟过程中不同发育阶段胞内游离Ca2+的变化进行了探测,以研究Ca2+对山羊卵母细胞成熟的调控作用。 激素、采卵方式、季节、成熟液配制用水质和成熟时间对山羊卵泡卵母细胞体外成熟影响的研究表明,添加1.5μg/ml 17β-E2、20μg/ml LH、10μg/ml FSH(LH:FSH=2:1)且培养22-24小时,卵母细胞成熟率显著高于其它各组(P<0.05);繁殖季节的山羊的卵母细胞其体外成熟率显著高于非繁殖季节(P<0.01);不同采卵方式及成熟液配制用水质对卵母细胞体外成熟均无显著影响(P<0.05)。 根据地衣红染色,对山羊卵母细胞的核染色体的形态观察发现,直径为2-3mm的卵泡其卵母细胞在体外分别培养0、4、14和24小时即可发育到GV、GVBD、MⅠ、MⅡ期。 研究发现,山羊卵母细胞GV、GVBD、MⅠ及MⅡ期胞内Ca2+平均水平分别为78.06、147.41、126.97、97.73nmol/L。在无钙培养液中山羊卵母细胞不发生GVBD。从而表明山羊卵母细胞GVBD的发生依赖于细胞内Ca2+水平的升高,而且发生GVBD后至MⅠ期的生理活动过程仍然是Ca2+支持的。