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鼻咽癌（Nasopharyngeal Carcinoma，NPC）是一种起源于鼻咽上皮的恶性肿瘤，好发于中国南方诸省及香港、台湾、新加坡华人群体，流行病学调查显示男、女性发病率约为2-3：1。目前认为鼻咽癌系由遗传因素、EB病毒（Epstein-Barr Virus）持续感染及环境因素等共同作用所致，是一种多基因遗传性疾病，涉及多个遗传易感位点。编码人类白细胞抗原（Human Leucocyte Antigen，HLA）的基因复合体定位于6P21.3，既往研究发现HLA-B*35、B*38、B*46、B*58与不同地域华人鼻咽癌相关。MHC-Ⅰ类链相关基因A（MHC Class-ⅠChain Related Gene A，MICA）位于HLA-B基因近着丝粒端46kb，含6个外显子，所编码MICA分子为跨膜糖蛋白，其中，第5外显子编码跨膜区。MICA分子是重要的细胞应激（Cell Stress）分子，MICA分子结合NKG2D／DAP10受体，激活NK细胞、CD8+T细胞、γδT细胞以清除病毒感染细胞、突变细胞。我们的第一部分工作研究MICA基因第5外显子（GCT）n序列重复多态性（MICA-Short Tandem Repeat polymorphism，MICA-STR）与湖南地区汉族人群鼻咽癌的相关性。采用荧光聚合酶链式反应-基因扫描（Polymerase Chain Reaction／Size-Sequencing，PCR／Size-Sequencing）和聚合酶链式反应-序列特异性引物技术（PolymeraseChain Reaction／Sequence Specific Priming，PCR／SSP）分析湖南地区一组汉族NPC患者（218例）和该地区一组正常汉族对照人群（196例）的MICA-STR等位基因及MICA基因缺失（MICA*Del）频率。结果显示，MICA*A9频率在患者组显著高于对照组．（Pc=0.0001002，OR=2.528，95％CI=1.636-3.907），MICA*A5.1频率在患者组显著低于对照组（Pc=0.006，OR=0.594，95％CI=0.437-0.806）。按性别分层的比较显示，MICA*A9在男性患者组频率显著高于男性对照组（Pc=0.000072，OR=3.255，95％CI=1.855-5.709），MICA*A5.1在男性患者组的频率显著低于男性对照组（Pc=0.000737，OR=0.486，95％CI=0.337-0.702）；各MICA-STR等位基因频率在女性患者组、女性对照组之间的差异无显著性（Pc＞0.05）。进一步的分析显示，MICA*A9与NPC的关联同性别之间存在显著交互作用（Xw2=41.58，P=0.0001）；在男性组，MICA*A5.1、MICA*A9与NPC的关联均存在基因拷贝数的剂量依赖关系：MICA*A5.1／MICA*A9杂合子的OR值明显高于其它MICA*A5.1携带者，但低于其它MICA*A9携带者。为建立湖南地区汉族人群MICA-STR，HLA-B单倍型数据库，并阐明该人群MICA*A5.1、MICA*A9与HLA-B基因之间的连锁关系，我们的第二部分工作采用荧光PCR／Size-Sequencing检测MICA-STR等位基因，采用PCR／SSP技术作HLA-B基因分型及检测MICA基因缺失，分析湖南地区58个随机选择的汉族正常核心家系共183个成员HLA-B、MICA-STR等位基因多态性，对85份无血缘关系的亲代样本数据作单倍型多样性、连锁不平衡（Linkage Disequilibrium，LD）分析。结果显示，170条HLA-B-MICA-STR亲代单倍型含30种HLA-B、MICA-STR组合方式，发现9种新的连锁类型；MICA*A9与HLA-B*35、B*38、B*51、B*58连锁，并与HLA-B*38、HLA-B*58呈显著连锁不平衡(△=0.0364，Pc=2.3558*10-4；△=0.0409，Pc=2.9830*10-4)；MICA*5.1与HLA-B*07、B*08、B*13、B*27、B*37、B*39、B*48、B60连锁，并与HLA-B60呈显著连锁不平衡(△=0.1341，Pc=6866*10-11)。为阐明MICA-STR与HLA-B基因在NPC相关性的原发／继发关系，和鉴定性别特异的NPC遗传易感HLA单倍型，我们的第三部分工作对湖南地区127例连续的新发NPC患者、112例连续的正常对照人群（源自第一部分工作的研究对象）采用PCR／SSP技术作HLA-A、B、DRB1基因DNA分型。结果显示，HLA-B*35、B*38、B*58与MICA*A9均呈唯一性（Exclusive）连锁关系；男性NPC患者组HLA-B*58频率显著高于男性对照组（OR=9.975，95％CI=2.637-37.73，Pc=0.0034）：男性NPC患者组HLA-DR17（DRB*03）频率显著高于男性对照组（OR=12.391，95％CI=2.05-75.01，Pc=0.0195）；男性NPC患者组HLA-B60频率低于男性对照组，校正P值处于临界水平（OR=0.416，95％CI=0.22-0.787，Pc=0.055）。女性NPC患者组、女性对照组HLA-A、B、DRB1频率差异无显著性。在男性组，当HLA-B*58-MICA*A9单倍型携带DR17（DRB1*03）时，OR值增至12.391（95％CI=2.05-75.01，P=0.00154）；当HLA-B*58-MICA*A9单倍型携带其它DRB1基因（Non-HLA-DR17）时，OR值明显下降（OR=5.734，95％CI=0.54-60.88，P=0.06）。此外，HLA-A*02、B*46在NPC患者组、对照组间（含按性别分层后的比较）的频率差异无显著性。我们第四部分工作分析位于HLA-Ⅰ类区远着丝粒端、HLA-A基因侧翼的7个多态性标记与湖南地区汉族人群NPC的相关性。采用荧光PCR／Size-Sequencing技术对D6S1624、D6S258、M6S211、D6S510等4个微卫星标记作分型，采用聚合酶链式反应-扩增片段长度多态性技术（Ampl ification Fragment Length Polymorphism，PCR／AFLP）检测AluyHF、AluyHG、AluyHJ的插入／缺失，分析该地区127例连续的新发NPC患者、112例连续的正常对照人群（同第三部分工作的研究对象）上述标记的频率差异。结果显示，该4个微卫星、3个AluyH家族成员的频率差异在NPC患者组、对照组间（含按性别分层后的比较）均无统计学上的意义。我们的研究结果首次表明：（1）MICA*A5．1、MICA*A9与湖南地区鼻咽癌关联，且呈现性别差异和基因拷贝数依赖关系；（2）初步构建该人群MICA-STR，HLA-B单倍型数据库，并发现9种新的MICA-STR，HLA-B连锁类型；（3）正常参照家系分析和病例一对照研究均显示，多个鼻咽癌相关HLA-B基因（含B*35、B*38、B*58）与MICA*A9连锁；（4）HLA-B*58-MICA*A9-DR17（DRB1*03）是该人群男性个体的一条鼻咽癌遗传易感HLA单倍型：（5）未发现HLA-Ⅰ类区远着丝粒端的7个多态性标记与湖南地区汉族人群NPC存在关联，我们提出该区域DNA遗传多态性与NPC关系的4种可能性。通过上述4部分DNA分型研究，我们首次报道，HLA-B至DRB1基因区间与湖南地区汉族人群NPC高度关联，且存在性别差异；我们的数据提示MICA*A9为湖南地区汉族人群鼻咽癌的一个原发（Primary）相关基因，基于MICA*A9与鼻咽癌相关HLA-B基因的连锁格局，提示MICA*A9可能为华人人群的一个共同的NPC易感标记；HLA-B*58-MICA*A9-DR17（DRB1*03）单倍型在HLA-B／DRB1区间存在未被认知的遗传缺陷，能调制（Modulate）NF-kappaB通路活性，进而与MICA*A9产生协同作用（Synergy），是进一步研究NPC高发于中国南方人群和揭示NPC发病存在男性优势的免疫遗传机制的一个良好模型。