基于S1蛋白核心中和表位区的猪流行性腹泻亚单位疫苗研究

来源 :西北农林科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaofyk
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的一种猪的急性、高度接触性肠道传染病,主要特征为腹泻、呕吐、脱水和高死亡率。自2010年以来,以PEDV变异株为主引起的PED在我国各省份广泛流行,对我国养猪业造成了严重的经济损失。疫苗免疫是目前防控PED的最有效途径,目前市场主要预防PED的疫苗为多联灭活、或弱毒疫苗,以上疫苗存在保护率低、安全性低、成本昂贵等缺点,未对PED实现有限地防控和净化,市场亟待开发更加安全、经济、高效的新型疫苗(尤其是亚单位疫苗)用于PED的防制。PEDV S1结构域是介导PED保护性免疫的主要功能区,核心中和表位(COE)是S1的最重要功能区,也是目前用于PED亚单位疫苗研究的最小保护抗原。  因此,本研究通过毕赤酵母表达系统对PEDV S1的COE进行表达。同时尝试将COE与人和猪的IgG1 Fc进行融合来提高COE抗原的免疫效果,取得的主要结果如下:  a)利用PCR分别扩增出COE、P1Fc、H1Fc片段,通过重叠PCR技术拼接COE-P1Fc和COE-H1Fc片段,成功构建了酵母表达载体pPICZαA-COE、pPICZαA-COE-P1Fc和pPICZαA-COE-H1Fc;  b)利用酵母表达系统分泌表达产物经Western blotting鉴定,结果表明成功的表达了rCOE、rCOE-P1Fc、rCOE-H1Fc3种蛋白。  c)免疫小鼠42 d后采集各组血清通过间接ELASA和中和试验评价机体产生抗体情况。间接ELASA结果表明3组实验组都产生了较高水平的抗体。血清中和试验结果显示rCOE、r COE-P1Fc、rCOE-H1Fc实验组中和效价依次为1∶160、1∶640、1∶512,rCOE-P1Fc、rCOE-H1Fc实验组中和效价显著高于rCOE实验组和PBS对照组,结果表明在COE基因基础上融合佐剂P1Fc、H1Fc,明显提高了PED亚单位疫苗效果。  本研究首次利用毕赤酵母表达系统表达S1蛋白核心中和表位融合蛋白,对研究PED亚单位疫苗进行首次尝试,且IgG1 Fc片段具有佐剂功能,能提高机体免疫力,成为防控PED的新型亚单位疫苗。
其他文献
1995年6月14日美国收获的第一包棉花是利用美国农业研究局的种质资源培育出来的新的商用品种,该新品种不但具有抵抗银叶病粉虱、多种严重危害棉花和其他作物害虫的特性,而且该
摘 要: 德育是学校教育永恒的主题,学生从学校毕业,可以不成材,但必须成人,因此,培养学生应具备的良好品德显得尤为重要。本文从学校教育的实际出发,提出了德育工作的四个措施,切实可行。  关键词: 新课改 德育 措施  德育,曾是我国传统教育的主体,孔子说:“三人行,则必有我师焉,择其善者而存之,其不善者而改之。”其中的“善”主要指良好的思想品德;孟子在《劝学》一文中提出,“学不可以已”,“君子博学
摘 要: 校园文化是一种“以人为本”的教育文化。校园文化建设包含物质的构建基础、制度的保障层面、行为的表现形式、精神的引领高点等。班级文化是校园文化的重要组织部分,应以班级文化建设为“点”串“线”,科学设计班级管理目标,精心布置班级育人环境,认真组织班级主题活动,努力营造班级和谐氛围,推动校园文化的健康发展。  关键词: 校园文化建设 以人为本 点线结合  杜威说:“学校是一种特别的环境,它用专门
山东省安丘市前儒林村和寿光市北徐村。小麦单产连续多年突破50()k,门对年又上新水平,经省“三。四”工程专家组实打验收,百亩高产方单产分别达到668skg和6584kg。通过田间考察,与
一、调研基本情况  (一)调研目的。  从2010年9月算起,诸暨市店口教办推行“教科研区域联动”已两年有余,参与课题研究的教师在数量上有较大提升,课题立项和获奖数量相应增加,区域内科研薄弱学校也有了明显起色,反映了我们的区域联动是很有成效的。这次开展“店口教师教育科研状况的调查”是一次回头看,旨在获取教师对教科研的认同度、参与度和主要困难及需要的外部支持等信息,为有针对性地提供优质教科研指导和服
案例背景:林某,担任班长,虽然成绩一般,但聪明能干,工作能力强,性格刚烈,处理班级某些问题的强硬态度甚至超过了作为班主任的我,同学对她又敬又畏,最初在班级可谓是一呼百应,
摘 要: 家庭教育中父母的缺失、隔代抚养的缺陷和农村幼教发展滞后等原因,使得学龄前幼儿的处境比学龄留守儿童更为艰难,给他们的发展带来更为不利的影响,他们是更容易受伤害的一个特殊群体,因此他们的生存状况需要引起全社会的重视。  关键词: 留守幼儿 生存现状 家庭教育  2008年2月,全国妇联发布的全国农村留守儿童状况报告称,0—5周岁农村留守幼儿占全国农村同龄儿童的比例为30.46%,集中分布在中
课堂是教学质量的生命线,近两年来我们着力构建自主、高效、优质的课堂,实现课堂教学的新突破,努力打造高效课堂已成为教师长期不懈的追求。各学科针对本学科的特点形成了自己的课堂教学模式,教师也在高效课堂教学实践中锻炼了自己,发展了自己。  一、打造高效课堂,推进课程教学改革势在必行  教师要深知在传统的教学模式中,教学活动都是以教师为主体的,教师在讲台上讲,学生在台下听,学生被动地接受教师讲授的知识,虽
我国的中等职业教育可以说是最复杂的教育,是中等教育和职业教育的混合体,其不光承担了职业技能教育,还承担了高中人文素养的培养。在国家大力发展职业教育方针的指引下,中等职业教育战线全体师生应以扩大中等职业教育规模为基础,以基础能力建设为重点,明确中职教育的培养目标,积极进行教育教学改革,努力提高职业学校办学水平,全面提高职业教育质量。  一、德育工作是基础  职业教育的办学理念是“德育为先、育人为本”
春马铃薯是山区、半山区的早熟高产春粮作物,具有生育期短、产量高、营养丰富等特点,既可做粮食,又是城镇居民的主要蔬菜之一。根据我县农民多年实践经验,要夺取马铃薯高产,