目的：1．建立安全、可行的胚胎活检方法；2．建立准确、可靠、稳定的可以应用于胚胎种植前遗传学诊断的FISH技术；3．利用荧光原位杂交技术对多元核发育而成的胚胎进行研究，分析多元核发育而成的胚胎染色体的异常性；4．利用荧光原位杂交技术对发育迟缓和胚胎碎片多的胚胎进行21号染色体分析，探讨21号染色体非整倍性与胚胎形态学指征的相关性；5．将荧光原位杂交技术应用于临床的胚胎种植前遗传学诊断。 方法：1．以小鼠8-细胞期胚胎为材料，利用酸性Tyrode’s法或机械切割法打孔，进行活检吸出1个卵裂球细胞，观察活检后小鼠胚胎的发育情况和囊胚形成率，比较两种方法是否有差异；2．收集受精后第三天的细胞数≤3的胚胎，进行固定和荧光原位杂交。3、将多原核发育成的受精后第二天的胚胎收集起来，用X染色体计数探针(CEPX，SpectrumGreen)和Y染色体计数探针(CEPY，SpectrumOrange)探针进行荧光原位杂交，观察IVF受精和ICSI受精的两组胚胎性染色体异常情况。4．将发育迟缓组和胚胎碎片40％组的胚胎，用21号染色体特殊位点探针(LSI21，SpectrumOrange)探针进行荧光原位杂交，观察两组胚胎21染色体异常情况；5．对具有PGD的临床医学指征的患者进行PGD周期治疗，挑选相适应的探针，将IVF-ET、胚胎活检和FISH技术三者结合起来，开展临床应用。 结果：1．酸性Tyrode’s打孔法和机械切割法两种活检方法，酸性Tyrode’s打孔法活检成功率高于机械切割打孔法，两者活检的成功率有显著性差异；酸性Tyrode’s打孔活检方法、机械切割打孔活检方法和未活检对照组的囊胚形成率，两两比较无显著性差异。2．胚胎固定杂交后，固定率为95．gi％，杂交率为93．62％；3．多原核发育成的胚胎IVF受精和ICSI受精的两组，IW受精后的3PN与ICSI受精的3PN的两组胚胎性染色体异常率进行比较，有显著性差异。4PN发育而成的胚胎很少，两组比较无统计学意义。4．发育迟缓组和胚胎碎片40％组的胚胎与正常胚胎的ZI染色体异常率有显著性差别。5．利用FISH技术共进行9个周期的PGD治疗，活检成功率96％，FISH杂交成功率为95．83％，妊娠成功2周期，成功率为22．22％。 结论：1．酸性Tyrode、打孔法活检成功率高于机械切割打孔法，而且酸性Tyfodeb打孔法操作较机械切割打孔法简单易掌握，决定在以后实验中以酸性Tyodeb打孔活检方法为主要的活检方法。2．在所选用和改进的方法步骤进行荧光原位杂交，结果显示，其方法稳定、杂交率高，与国外报告文献结果相似，可以作为PGD研究和临床应用的方法。3．IVF受精和 ICSI受精的3PN胚胎发育有差异，证明＊F受精和 ICSI受精的3PN中的原核的来源是不同，导致胚胎第一次卵裂的方式也不同。IVF受精和 ICSI受精的3PN胚胎的性染色体的异常率非常高，正常H倍体出现的比例极低，分别为：3I7％和 2．94％。因此，在胚胎移植时多原核发育成的胚胎必须淘汰4．胚胎卵裂的速度和胚胎碎片的多少与胚胎内部染色体的非整倍性存在着相关性。目前在不损伤胚胎的前提下还不能对胚胎的染色体进行全面的分析时，在选择胚胎移植，有必要选择形态和卵裂速度都正常的胚胎。5．利用FISH技术进行PGD治疗9周期，获得2例妊娠，说明本中心也具备了开展PGD临床应用的基础和能力。