激光去除根管内玷污层及对体外粪肠球菌生物膜杀菌效果的研究

来源 :第四军医大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:youlan26
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根管治疗高质量地完成根管预备和根管消毒是实现有效控制感染的前提,然而在根管预备的过程中,由于根管系统的复杂性及器械预备的局限性,根管中会有大部分区域未预备到,特别是根尖1/3处,存在侧枝根管,管间交通,根管峡区,根尖分叉,根尖分歧等复杂的解剖结构,碎屑及细菌很容易堆积在这些部位形成玷污层,而传统的冲洗技术作用较表浅,仅能去除根上、根中段的玷污层,而根尖1/3处的玷污层很难去除。近年来,激光作为一种新型的辅助冲洗的工具已被用于临床,它在去除玷污层方面有一定的效果,但其结合的冲洗剂种类和作用时间不尽相同,因此本论文第一个部分研究Er,Cr:YSGG激光和Er:YAG激光结合不同冲洗剂作用不同时间去除玷污层的效果。细菌及其副产物是牙髓和根尖周疾病的主要病因,根管治疗术的核心思想是感染控制,既要彻底去除根管内感染,又要杜绝再感染。然而据报道根管治疗的成功率为85%-90%,根管治疗失败的主要原因之一是持续性根尖周炎的存在,粪肠球菌常从持续性根尖炎及治疗失败的患牙中检出,它是一种革兰阳性兼性厌氧球菌,它们能彼此黏附到一起,且侵入牙本质小管,形成粪肠球菌生物膜,而且它能忍受长期营养缺乏条件的限制,且能抵抗冲洗剂和根管封药的影响,目前常使用Na OCl作为冲洗剂消毒,然而它只能渗入到牙本质小管内130μm,对于更深层的细菌作用不到。近年来,多种激光用于辅助根管消毒,如Er,Cr:YSGG激光,Er:YAG激光,Nd:YAG激光,Diode激光,a PDT等,以往文献报道它们都能以直接或间接方式杀菌,且对牙本质小管深层的细菌有一定的效果,但对于其杀菌效果报道不一,因此本论文第二个部分是比较五种激光的杀菌效果。实验共分为以下两个部分:第一部分Er:YAG激光和Er,Cr:YSGG激光活化冲洗去除根管玷污层的研究实验一根管玷污层模型的建立本实验先收集人离体单根牙,在体外通过模仿临床根管预备的过程,使用M3机用镍钛器械并采用冠向下预备的方法预备根管至35#/04锥度,换锉期间使用0.5%Na OCl冲洗,后于扫描电镜下观察,结果表明玷污层模型建立成功。实验二Er:YAG激光和Er,Cr:YSGG激光活化冲洗对根管玷污层去除效果的研究本实验在实验一玷污层模型建立的基础上,选取90个人离体单根牙,依据终末冲洗方式不同,分为9组,A:5.25%Na OCl,B:Er:YAG+5.25%Na OCl,C:Er,Cr:YSGG+5.25%Na OCl,D:17%EDTA,E:Er:YAG+17%EDTA,F:Er,Cr:YSGG+17%EDTA,G:5.25%Na OCl+17%EDTA,H:Er:YAG+5.25%Na OCl+17%EDTA,I:Er,Cr:YSGG+5.25%Na OCl+17%EDTA;每组各作用60s,处理完后于扫描电镜下观察并使用评分标准进行评分,后行统计学分析。结果Er:YAG激光和Er,Cr:YSGG激光显著增强了Na OCl、EDTA及Na OCl+EDTA去除玷污层的作用(P<0.05)。去玷污层有效性由强到弱的方法是LAI+Na OCl+EDTA,LAI+EDTA>LAI+Na OCl,Na OCl+EDTA>EDTA>Na OCl。结论:在所有的处理组中,LAI+Na OCl+EDTA是最有效地能去除整个根管壁玷污层的方法,而又以Er:YAG+Na OCl+EDTA的效果最佳,以期提高根管治疗的成功率。第二部分五种激光对体外粪肠球菌生物膜杀灭效果的研究实验一牙本质小管内粪肠球菌生物膜模型的建立本实验使用人离体单根牙釉牙骨质界下4mm牙本质段,制备4×4×2mm3牙本质片,使用5.25%Na OCl和17%EDTA在超声水浴去除玷污层,后行高压蒸汽灭菌,然后使用扫描电镜观察玷污层去除及灭菌情况,然后植入粪肠球菌,培养3周,行扫描电镜观察粪肠球菌模型是否建立,然后随机选取其它样本行活死菌染色,后立即置于激光共聚焦显微镜观察,并行三维重建,SEM和CLSM结果表明粪肠球菌模型建立成功。实验二激光共聚焦观察Na OCl对牙本质小管内粪肠球菌生物膜的杀菌效果在实验一粪肠球菌模型建立的基础上,随机选择样本,分为四组分别是5.25%Na OCl处理1、3、5、10min,然后使用活死菌染液对细菌生物膜进行染色,立即置于CLSM下观察,然后行三维重建,并使用Image-Pro-Plus软件计算死菌的比例,结果:随Na OCl作用时间延长,杀菌效果增强,差异有统计学意义(P<0.05),结论:5.25%Na OCl作用10min,杀菌效果最好。实验三激光共聚焦观察五种激光对牙本质小管内粪肠球菌生物膜的杀菌效果体外按照实验一的方法建立粪肠球菌感染牙本质小管模型,随机分为6组:A组:5.25%Na OCl,B组:Nd:YAG激光,C组:Diode激光,D组:Er,Cr:YSGG/Na OCl,E组:Er:YAG/Na OCl,F组:Nd:YAP/Na OCl,每组作用时间1、3min,然后行活死菌染色,并立即置于CLSM下观察,后行三维重建,并使用Image-Pro-Plus软件计算死菌所占的比例,结果:Er,Cr:YSGG,Er:YAG,Nd:YAP激光能显著增强Na OCl的杀菌效果(P<0.05),Er,Cr:YSGG/Na OCl及Er:YAG/Na OCl杀菌效果无统计学差异(P>0.05);Nd:YAG激光和Diode激光杀菌效果相当(P>0.05),激光活化组杀菌率高于激光直接照射组(P<0.05),杀菌效果由强到弱的排序为Er:YAG/Na OCl,Er,Cr:YSGG/Na OCl>Nd:YAP/Na OCl>Nd:YAG,Diode>Na OCl。结论:Er:YAG和Er,Cr:YSGG激光能显著增强Na OCl杀菌效果,尤以Er:YAG/Na OCl的效果最佳。
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