交感神经系统活动过度增强是慢性心力衰竭（chronic heart failure，CHF）的重要特征，在CHF的发生、发展中起重要作用。心交感传入反射（cardiacsympathetic afferent reflex，CSAR）属于交感神经兴奋性反射，其反射效应是血压升高和交感神经系统活动加强。CSAR病理性增强是导致CHF状态下交感神经系统过度激活的重要原因之一。CHF状态下CSAR增强机制与心交感传入神经活动增多和CSAR的中枢敏感性增强机制有关。下丘脑室旁核（paraventricularnucleus，PVN）是CSAR反射弧通路中的关键中枢部位，同时也是调控交感神经活动和心血管活动的重要核团。CHF大鼠PVN中血管紧张素II（Ang II）作用于AT1受体，导致CSAR增强、交感神经紧张性活动加强和动脉血压升高。为了避免压力感受器和迷走神经传入活动对CSAR和交感神经活动的影响，过去实验研究CSAR时均在双侧迷走神经切断和去压力感受器神经支配的动物进行。因此，一个关键的问题亟待解决，这些研究结果是否也适用于迷走神经和压力感受器神经完整的动物。另外，动脉压力感受器和迷走神经传入活动对CHF大鼠增强的CSAR的作用仍不明确，而且动脉压力感受器和迷走神经传入活动对CHF大鼠PVN中Ang II效应的影响也不清楚。目的探讨在迷走神经和压力感受器传入神经保持完整的CHF大鼠中CSAR是否增强，动脉压力感受器和迷走神经传入活动是否抑制CHF大鼠增强的CSAR和PVN中Ang II介导的CSAR增强效应。方法实验在雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠上进行。大鼠随机分为慢性心力衰竭模型组（CHF组）和假手术组（Sham组）。急性动物实验于冠状动脉结扎手术或假手术后7周末进行。CHF和Sham大鼠分别随机分为四组：双侧迷走神经切断组（VT）、双侧去压力感受器神经支配和迷走神经切断组（BD+VT）、双侧心交感神经去支配组（CSD）和对照组（迷走神经、压力感受器神经和心交感神经完整，INT）。采用立体定位仪进行大鼠双侧PVN定位和核团微量注射药物，利用Powerlab生物信号采集系统在体记录肾交感神经放电活动（RSNA）、平均动脉压（MAP）和心率（HR）。以心室表面非梗死区应用辣椒素（capsaicin）的方法引起CSAR，以辣椒素引起RSNA变化的百分率作为评价CSAR的指标。1．探讨VT、BD+VT或CSD不同的神经去支配对CHF大鼠CSAR的影响。2．探讨VT、BD+VT或CSD不同的神经去支配对CHF大鼠PVN中Ang II诱导的CSAR、RSNA和MAP增强作用的影响。结果1．CHF大鼠左心室梗死面积平均为左心室面积的34.0%，而Sham组大鼠没有明显的心肌梗死。与Sham大鼠相比，CHF大鼠心脏的重量和心脏重量与体重比值显著增加，这提示CHF大鼠心肌非梗死区发生肥大。CHF大鼠动脉收缩压、左心室收缩峰值压（LVSP）和左心室压力最大上升速率（+LV dP/dtmax）降低，而左心室舒张末期压（LVEDP）增加。2．与Sham大鼠比较，INT、VT、BD+VT和CSD组CHF大鼠MAP和HR未见明显改变；在CHF大鼠中CSD明显使HR减慢，而Sham大鼠各组之间MAP和HR均无显著性差异。3．心室表面应用辣椒素使INT、VT和BD+VT大鼠RSNA增强和MAP升高，却使CSD大鼠RSNA减弱和MAP降低。经INT、VT或BD+VT处理后，CHF大鼠对辣椒素引起的兴奋效应明显强于Sham大鼠；而经CSD处理后，CHF大鼠对辣椒素引起的抑制效应与Sham大鼠无显著性差异。与INT大鼠相比，经VT处理后的Sham和CHF大鼠RSNA和MAP对辣椒素的反应明显增强；且在CHF大鼠中，BD+VT大鼠RSNA和MAP对辣椒素的反应更加强烈。4．经INT、VT和BD+VT处理后，CHF大鼠PVN微量注射Ang II引起RSNA和MAP的增强效应明显强于Sham大鼠。与INT组相比，经VT和BD+VT处理后的Sham和CHF大鼠PVN微量注射Ang II引起RSNA和MAP的增强效应有增强的趋势，但无统计学差异；而在CHF大鼠中CSD明显抑制Ang II引起RSNA和MAP的增强效应。5．在Sham大鼠中，PVN微量注射Ang II显著加强BD+VT大鼠辣椒素诱导的CSAR效应；在CHF大鼠中，PVN微量注射Ang II显著增强INT、VT和BD+VT大鼠辣椒素诱导的CSAR效应。PVN微量注射Ang II对辣椒素诱导的CSAR增强效应在CHF大鼠中更加明显。与INT大鼠相比，PVN微量注射AngII对辣椒素诱导的CSAR增强效应在VT大鼠中更加明显，在BD+VT大鼠中最显著。PVN微量注射Ang II对CSD大鼠辣椒素诱导的抑制效应无显著性作用，且在Sham和CHF大鼠之间也无统计学差异。结论迷走神经、压力感受器神经和心交感神经保持完整的CHF大鼠CSAR显著增强。动脉压力感受器和迷走神经传入活动抑制CHF大鼠增强的CSAR，并抑制PVN中Ang II介导的CSAR增强效应。背景交感神经系统过度激活是慢性心力衰竭（chronic heart failure，CHF）的重要特征之一。抑制过度激活的交感神经活动业已成为CHF的治疗靶点之一。心交感传入反射（cardiac sympathetic afferent reflex，CSAR）病理性增强参与了CHF状态下交感神经系统的过度激活。下丘脑室旁核（paraventricular nucleus，PVN）是心血管活动整合的重要中枢结构之一，也是CSAR中枢通路的重要组成部分，并参与调控CHF增强的CSAR和交感神经活动。硫化氢（hydrogen sulfide，H2S）是一种气体信号分子，其外周效应表现为心肌保护和血管舒张。脑内H2S主要由胱硫醚-β-合酶（cystathionine-β-synthase，CBS）合成。作为重要的心血管活动整合中枢，PVN中H2S对心血管活动的调节作用尚不明确，而且在CHF状态下PVN中H2S是否参与调控CSAR和交感神经活动也不清楚。目的探讨PVN中H2S对CHF大鼠交感神经活动、动脉血压和CSAR的调控作用。方法实验在雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠上进行。大鼠随机分为慢性心力衰竭模型组（CHF组）和假手术组（Sham组）。急性动物实验于冠状动脉结扎手术或假手术后7周末进行。采用立体定位仪进行大鼠双侧PVN定位和核团微量注射药物，利用Powerlab生物信号采集系统在体记录肾交感神经放电活动（RSNA）、平均动脉压（MAP）和心率（HR）。以心室表面非梗死区应用辣椒素（capsaicin）的方法引起CSAR，以辣椒素引起RSNA变化的百分率作为评价CSAR的指标。酶联免疫吸附测定法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）检测PVN中H2S和CBS水平以及CBS活性。1．H2S供体GYY4137和CBS抑制剂羟胺（hydroxylamine，HA）的时间效应：PVN微量注射1%DMSO、GYY4137（2nmol）以及HA（3nmol），观察对正常大鼠RSNA、MAP和HR影响的时间效应。2．H2S释放：正常大鼠PVN注射Saline、1%DMSO或5种剂量的GYY4137（0.01，0.1，1，2或4nmol），4分钟后立即断头取脑，液氮速冻后保存于-70℃低温冰箱中。用ELISA法检测PVN中H2S水平。3．GYY4137的剂量效应：PVN注射1%DMSO或5种剂量的GYY4137（0.01，0.1，1，2或4nmol），观察对Sham和CHF大鼠基础RSNA、MAP和CSAR的剂量效应。4．HA的剂量效应：PVN注射1%DMSO或2种剂量的HA（0.3或3nmol），观察对Sham和CHF大鼠基础RSNA、MAP和CSAR的剂量效应。5．PVN中H2S和CBS水平以及CBS活性：在大鼠心室表面重复应用生理盐水或辣椒素3次后立即断头取脑，用ELISA法检测Sham和CHF大鼠PVN中H2S和CBS水平以及CBS活性。结果1．CHF大鼠左心室梗死面积平均占左心室面积的30.1%，而Sham组大鼠没有明显的心肌梗死。与Sham大鼠相比，CHF大鼠心脏的重量和心脏重量与体重比值显著增加，这提示CHF大鼠心肌非梗死区发生肥大。CHF大鼠动脉收缩压、左心室收缩峰值压（LVSP）和左心室压力最大上升速率（+LV dP/dtmax）降低，而左心室舒张末期压（LVEDP）增加。2．PVN中注射1%DMSO对RSNA、MAP和HR无显著作用。给药后2min，GYY4137明显增强RSNA，升高MAP和加快HR；给药后4min左右，这种兴奋性作用达到峰值；给药后8min左右，其作用逐渐恢复正常。PVN中微量注射HA对RSNA、MAP和HR无显著性作用。3．与生理盐水或DMSO相比，PVN中注射低剂量GYY4137（0.01和0.1nmol）对PVN中H2S水平无显著影响；PVN注射中剂量GYY4137（1nmol）使PVN中H2S水平有升高趋势，但无统计学差异；PVN注射高剂量GYY4137（2和4nmol）使PVN中H2S水平显著升高。4．与DMSO相比，PVN注射低剂量GYY4137（0.01和0.1nmol）对Sham和CHF大鼠基础RSNA、MAP和CSAR均无显著影响；PVN注射中剂量GYY4137（1nmol）使Sham和CHF大鼠基础RSNA增强和MAP升高，但对CSAR无显著影响；PVN注射高剂量GYY4137（2和4nmol）对Sham和CHF大鼠基础RSNA和MAP的增强效应更明显，并且使CSAR显著增强。与Sham大鼠相比，CHF大鼠PVN注射DMSO和低剂量GYY4137（0.01和0.1nmol）以及中剂量GYY4137（1nmol）对基础RSNA和MAP均无显著影响，但CSAR显著增强；CHF大鼠PVN注射高剂量GYY4137（2和4nmol）显著增强基础RSNA和升高MAP以及加强CSAR。5．与DMSO相比，PVN注射HA（0.3和3nmol）对Sham和CHF大鼠基础RSNA和MAP以及CSAR均无显著影响。与Sham大鼠相比，CHF大鼠PVN注射DMSO和HA（0.3和3nmol）对基础RSNA和MAP均无显著影响，但CSAR显著增强。6．心室表面应用辣椒素使Sham和CHF大鼠PVN中H2S水平明显降低和CBS活性明显减弱，并且对Sham大鼠PVN中CBS活性的抑制性作用更加明显。与Sham大鼠相比，心室表面应用生理盐水后CHF大鼠PVN中H2S水平明显降低和CBS活性明显减弱。心室表面应用辣椒素对Sham和CHF大鼠PVN中CBS含量没有显著性作用，并且在心室表面应用生理盐水后Sham和CHF大鼠PVN中CBS含量没有统计学差异。结论PVN中外源性H2S对CHF大鼠CSAR和交感神经活动具有增强效应，而PVN中内源性H2S在CHF大鼠CSAR增强和交感神经激活中不起主要作用。