中药材中植物生长延缓剂残留及其检测方法研究

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目的:调查多效唑等植物生长延缓剂(俗称壮根灵)在根及根茎类中药材种植过程中的应用情况,并对应用较为普遍的药材进行残留检测。以全面了解植物生长延缓剂在药材中的残留现状。方法:1)调查:通过对道地药材产区农业物资销售店、药材种植户、药材经营户、政府农业技术部门等的调查,了解药材种植过程中植物生长延缓剂的使用种类、使用历史、使用时间、使用数量、使用方法等情况,并对药材和药剂进行取样,测定药剂中是否含有植物生长延缓剂。调查药材及区域分别是:四川省江油市太平镇彰明镇附子、彭州敖平镇川芎、彭山谢家镇泽泻、绵阳花园镇麦冬,云南文山州三七,河南武陟大封镇牛膝、山药、地黄、黄芪甘肃岷县当归、党参等根和根茎类药材。2)QuEChERS-反相高效液相色谱-串联质谱法测定麦冬中多效唑、烯效唑的残留:样品首先用乙腈溶液提取,再经过QuEChERS(Quick、Easy、Cheap、Rugged、Safe)处理后,以ThermoBDSHYPERSILC18色谱柱(100mm×4.6mm,2.4mm)为分析色谱柱,0.1%甲酸的0.005mol/L醋酸铵溶液:乙腈=25:75(V:V)作为流动相进行梯度洗脱分离,在电离方式为电喷雾正离子(ESI+)模式下以多反应监测(MRM)方式检测,采用麦冬空白样品基质匹配标准溶液进行外标法定量。3)HILIC高效液相色谱-串联质谱法测麦冬等7种根及根茎类药材中5种植物生长延缓剂的残留:样品经甲醇提取,过滤后,以WatersAtlantisHILIC色谱柱(150mm×2.1mm,3.0mm)为分析色谱柱,0.1%甲酸的0.005mol/L醋酸铵溶液:甲醇:乙腈=13:15:72(V:V:V),为流动相进行梯度洗脱分离,在电离方式为电喷雾正离子(ESI+)模式下,以多反应监测(MRM)方式检测,基质匹配标准溶液外标法定量。结果:1)麦冬、泽泻、牛膝、川芎、地黄、丹参、当归、三七在各自主产区的种植过程中均不同程度的使用了植物生长延缓剂,但植物生长延缓剂的施用剂量,施用时间均未有明确的规范,其在中药材的残留情况也未受到关注。有些药剂含有植物生长延缓剂但未标明,可能导致植物生长延缓剂的过量使用。2)QuEChERS-反相高效液相色谱-串联质谱法测定麦冬中多效唑、烯效唑的残留:多效唑、烯效唑浓度在1.0~100ng/mL范围内,线性相关系数分别为R2=0.9984,R2=0.9957。麦冬中三水平多效唑、烯效唑加标回收率在83.4%~96.3%之间,相对标准偏差为2.5%~7.9%,33份麦冬药材样品中,多效唑含量范围为0.01mg/kg~2.08mg/kg。烯效唑含量范围为0.01mg/kg~0.13mg/kg。3)HILIC高效液相色谱-串联质谱法测定7种根类药材中5种植物生长延缓剂的残留:多效唑,丁酰肼,矮壮素,氯化胆碱、缩节胺在各自的线性范围内均呈现良好的线性关系,相关系数R2>0.9997。7种中药材中的4种植物生长延缓剂的3个添加水平的回收率为79.3%~103.3%,相对标准偏差(RSD)均不大于11%。7种中药材中都检测出一种或以上的植物生长调节剂,氯化胆碱含量在3034.6μg/kg~8837.8μg/kg,其他含量范围在6.0μg/kg~1351.6μg/kg之间。结论:所建立的QuEChERS-反相高效液相色谱-串联质谱法快速测定麦冬中多效唑、烯效唑的残留。HILIC高效液相色谱-串联质谱法可以同时测定4种水溶性和脂溶性植物生长延缓剂,可为植物生长延缓剂在麦冬等中药材种植中的安全使用和限量制定提供依据和参考。7种中药材种植过程中都不同程度地使用植物生长延缓剂,其中使用较为普遍的中药材依次是麦冬、川芎、泽泻、当归、丹参、三七、牛膝。
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