目的：探讨瘦素(leptin)在病理性瘢痕(pathological scars)中的表达情况以及 leptin在不同时间、不同浓度的人瘢痕成纤维细胞（human keloid fibroblasts,HKF）和人皮肤成纤维细胞(human skin fibroblasts,HSF)上清液中的表达情况，从而进一步了解 leptin是否参与病理性瘢痕的发生发展并为病理性瘢痕的防治提供一些新的理论思路和依据。对象与方法：1、实验所用标本，包括瘢痕疙瘩、增生性瘢痕及正常皮肤组织均来源于四川省人民医院皮肤外科与烧伤科(2015年2月至2015年11月)，分为瘢痕疙瘩组（n=20）、增生性瘢痕组（n=20），正常皮肤组织组（n=10）。取材前均获得患者知情同意。病理性瘢痕患者年龄16-50岁，其中男性18例，女性22例，病程为6月至6年，且患者于术前1年内未进行放疗、局部注射或外用防治瘢痕药物。正常皮肤组织来源于四川省人民医院皮肤外科植皮术取皮时多余皮肤，患者年龄16-50岁。应用免疫组织化学法（SP法），标本经石蜡包埋后切片3张，取第一张切片行HE染色，读片以确定标本为正常皮肤组织或病理性瘢痕，取第二张切片滴加一抗（兔抗人leptin），而第三张切片滴加PBS作一抗阴性对照。评分标准按照Shimizu法[1]分析，主要依据被染色的阳性细胞数以及颜色的深浅计分：阳性细胞百分比<5％为0分，<33%为1分，33%～66%为2分，>75%为3分；未着色即为0分，着色浅（淡黄色）即为1分，着色深（棕黄色）即为2分，棕褐色即为3分。将以上两评分相加，所得之和≤1分即为阴性(-),阳性(+)为2～4分,强阳性(++)≥5分，+～++判断为阳性。用SPSS20.0统计软件对实验所得数据进行相关统计学分析。2、培养瘢痕成纤维细胞的组织来源于四川省人民医院皮肤外科手术治疗的男性瘢痕疙瘩患者，将无菌瘢痕组织用无菌PBS反复洗净，除去表皮及皮下组织，将组织剪成细末状，随后置于5%CO2、37℃培养箱进行原代培养。观察细胞形态，拍照，培养传代，利用免疫组织化学法（SP法）确定其为瘢痕成纤维细胞（HKF）。实验所用人皮肤成纤维细胞（HSF）来源于中国科学院昆明细胞库。3、将HKF、HSF以6×104/ml及9×104/ml两种浓度分别接种于六孔板中，利用酶联免疫吸附测定法（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）测定分别于接种后24h、48h、72h收集的细胞培养上清液的leptinOD值。用标准品的浓度梯度和OD值算出曲线方程，根据标准曲线即可得到所对应的细胞培养上清液中 leptin浓度，最后用 SPSS20.0统计软件进行相应统计学分析。结果：1、leptin在正常皮肤组织、增生性瘢痕、瘢痕疙瘩的表达情况：⑴对比 leptin在正常皮肤组织组、增生性瘢痕组、瘢痕疙瘩组真皮层表达情况的差异得出2?=34.074，P<0.001，差异具有统计学意义。将以上三组两两比较：leptin在瘢痕疙瘩组的表达高于正常皮肤组织组，差异具有统计学意义(Z=-5.161,P<0.001)，在增生性瘢痕组的表达高于正常皮肤组织组，差异具有统计学意义(Z=-4.603,P<0.001)，而在瘢痕疙瘩组的表达高于增生性瘢痕组，差异具有统计学意义(Z=-2.054,P=0.04)。⑵leptin在正常皮肤组织组、增生性瘢痕组、瘢痕疙瘩组表皮层的表达：leptin在三组表皮层中的表达无明显差异，?2=1.633，P=0.442，差异无统计学意义。2、瘢痕疙瘩成纤维细胞的原代培养：将HKF进行免疫组织化学法（SP法）鉴定,结果显示细胞波形蛋白（Vimentin）呈阳性反应图，即细胞鉴定为 HKF。3、ELISA检测HKF、HSF培养上清leptin的表达情况：⑴浓度为6×104/ml的HKF在接种后24h、48h、72h收集的细胞培养上清液中leptin OD值的均值±标准差分别为0.083±0.009，0.089±0.016，0.090±0.009；浓度为6×104/ml的HSF在接种后24h、48h、72h收集的细胞培养上清液中leptin OD值的均值±标准差分别为0.065±0.015，0.068±0.013，0.073±0.013；⑵浓度为9×104/ml的HKF在接种后24h、48h、72h收集的细胞培养上清液中leptin OD值的均值±标准差分别为0.091±0.011，0.098±0.014，0.098±0.009；浓度为9×104/ml的HSF在接种后24h、48h、72h收集的细胞培养上清液中 leptin OD值的均值±标准差分别为0.075±0.010，0.077±0.017，0.086±0.004；⑶利用独立样本t检验进行统计学分析，细胞浓度为6×104/ml时，所有时间点上HKF培养上清液中leptin浓度均较HSF高，差异具有统计学意义（P<0.05）；⑷细胞浓度为9×104/ml时，所有时间点上HKF培养上清液中leptin浓度也均较HSF高，差异具有统计学意义（P<0.05）；⑸在HKF中，当细胞浓度为9×104/ml时，所有时间点的leptin浓度均高于细胞浓度为6×104/ml组在第72小时的观察值，说明细胞浓度促进瘦素蛋白增长的效应较时间效应显著。在HSF中亦存在此现象。结论：1.leptin在病理性瘢痕中表达的增多可能与病理性瘢痕的发生、发展有关。2.leptin参与病理性瘢痕的发病机制与瘢痕成纤维细胞有关，并有浓度、时间相关性。3.通过监测 leptin蛋白在瘢痕组织中表达的升高或者降低，可能有助于判断其发展、转归。4.为探讨 leptin参与病理性瘢痕发病的信号通路及寻找两者的作用靶点的相关研究提供理论思路。