隔山逍遥方对腹泻型肠易激综合征大鼠IL-1β、5-HT、SP表达的影响

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目的:肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)包括腹泻型(IBS-D)、便秘型(IBS-C)、混合型(IBS-M)和未定型(IBS-U),我国以IBS-D为常见,现研究报道表明中医治疗IBS-D有丰富经验。隔山逍遥方为导师临床应用治疗IBS-D的经验方。本实验通过建立IBS-D大鼠模型,观察隔山逍遥方对IBS-D大鼠血清IL-1β、5-HT、血浆SP表达的影响,以探讨隔山逍遥方治疗IBS-D的作用机制。方法:将100只健康清洁级Wistar大鼠,随机分成5组,空白组(N组)、模型组(M组)、对照组(C组)、隔山逍遥方大剂量组(HD组)、隔山逍遥方小剂量组(LD组),每组20只。除空白组外,其余四组采用1ml1%醋酸灌肠结合改良夹尾刺激方法综合造模。造模成功后,空白组仍继续正常喂养,模型组给予生理盐水灌胃,其他治疗组给予相关药液灌胃,连续治疗2周,期间观察大鼠活动、精神、被毛、大便性状等一般情况,2周后处死大鼠,取材,并按试剂盒说明检测、分析隔山逍遥方对大鼠IL-1β、5-HT、SP表达的影响。结果:1.一般情况N组实验过程中大鼠体重逐渐上升,皮毛光泽,精神可,饮食量随日龄逐渐增加,大便正常,无明显稀便。M组在造模第3天开始个别大鼠出现稀便,精神萎靡,至第15天开始M组中大鼠粪便均为稀便,便潜血试验为阴性,所有大鼠肛周均有不同程度粪便粘附,腹部收缩明显,形体消瘦,被毛光泽度差,且被毛松散,饮食量明显减少。C组、HD组、LD组在造模过程中大鼠表现均同M组相似,药物治疗1周后,C组、HD组稀便症状明显缓解,腹部收缩减少,体重开始增加,饮食量及活动开始增多,至用药2周后HD组大鼠腹部收缩基本消失,偶见有稀便,被毛光泽度与N组基本相当;C组大鼠腹部收缩明显缓解,偶见有稀便,被毛光泽度较HD组略差。LD组在治疗过程中症状得到缓解,但不如C组、HD组明显。2.结肠组织大体观察及光镜下观察治疗结束后观察大鼠结肠及镜下组织染色,各组均未发现明显溃疡、出血糜烂及明显炎性细胞浸润等情况,各组间无明显差异。3. IL-1β、SP、5-HT检测结果M组IL-1β表达为(184.15±13.16)ng·L~-1,高于N组IL-1β表达为(118.70±11.30) ng·L~-1(P<0.05)。C组结果为(134.35±8.93)ng·L~-1,HD组IL-1β表达(130.85±8.23)ng·L~-1,LD组IL-1β表达(154.75±8.97)ng·L~-1,同M组比较,P<0.05差异具有统计学意义。HD组与C组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。HD组、C组同LD组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。C组、HD组、LD组同M组比较,P<0.05,差异有统计学意义。M组5-HT血清表达为(133.93±16.64)ng·ml~-1,高于N组5-HT的(81.35±10.39) ng·ml~-1,P<0.05,差异有统计学意义。 C组结果为(91.70±11.13) ng·ml~-1,HD组5-HT血清表达为(90.64±11.72)ng·ml~-1,LD组结果为(109.89±14.89)ng·ml~-1,分别同M组相比,P<0.05,差异具有统计学意义。HD组同C组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。HD组、C组同LD组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。C组、HD组、LD组同M组比较,P<0.05,差异有统计学意义。M组血浆SP表达为(61.86±2.51) pg·ml~-1,高于N组血浆SP(48.77±1.95)pg·ml~-1,P<0.05,差异具有统计学意义。C组血浆SP结果为(52.37±2.16)pg·ml~-1,HD组血浆SP结果为(52.55±2.50)pg·ml~-1,LD组血浆SP结果为(59.22±2.50)pg·ml~-1,分别同M组相比,P<0.05,差异具有统计学意义。HD组同C组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。HD组、C组同LD组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。C组、HD组、LD组同M组比较,P<0.05,差异有统计学意义。结论:实验研究表明,隔山逍遥方能够改善大鼠腹痛、稀便、被毛、体重、精神状态等一般情况。隔山逍遥方能够明显下调IL-1β、SP、5-HT表达水平,从而改善大鼠一般情况,并呈现出一定的量-效关系,大剂量组疗效要优于低剂量组疗效,且实验表明隔山逍遥方大剂量组与匹维溴铵片对照组在下调IL-1β、P物质、5-HT表达水平相当。
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