黄花蒿和丁香挥发油抑制三七病害发生的研究

来源 :云南中医药大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:zhoujiayan
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目的:三七属喜阴植物,由于其特殊的生长环境,容易导致各种病害的发生。又因其需求量巨大,人工种植面积的不断扩大,导致其病害问题日益严重。三七病害主要包括地上部分和地下部分病害,其严重地影响三七的产量和品质。因此寻找一种安全、有效的新型植物源农药是解决三七病害,提高三七品质的有效途径。本研究以黄花蒿、公丁香、母丁香为研究对象,研究其粗提物和挥发油对引起三七病害病原菌的抑制作用,为三七病害的生态防控提供一定的理论依据。方法:1.测定黄花蒿叶甲醇粗提物对尖孢镰刀菌孢子萌发率、孢子活力、菌丝生长、产孢量的影响。2.测定黄花蒿不同极性提取物对三七根腐病病原菌的抑制作用及对根腐病的防治效果。3.采用水蒸气蒸馏法提取植物挥发油并检测其对引起三七病害的病原菌抑制作用。4.通过GC-MS分析挥发油的主要成分及其含量。5.通过96孔板法测定挥发油及其单体化合物的最小抑菌浓度。6.通过棋盘法测定精油与化药恶霉灵联用后对病原菌的协同增效作用。结果:1.黄花蒿叶的甲醇粗提物能降低尖孢镰刀菌的孢子萌发率和孢子活力,抑制其菌丝生长和产孢量增加,且随着黄花蒿叶甲醇粗提物浓度的增大,对尖孢镰刀菌的抑制作用变强。2.采用不同浓度的甲醇分别提取黄花蒿的根、茎、叶并做相关抑菌实验,结果表明,黄花蒿叶的甲醇粗提物对病原菌的抑制效果最显著。对黄花蒿叶进行不同极性组分的提取并做相关抑菌实验,发现黄花蒿叶低极性组分挥发油的抑制效果最显著。盆栽试验结果显示,黄花蒿石油醚提取物在一定浓度范围内,对侵染三七植株的发病率有一定的防控作用。3.离体实验测定结果表明,公丁香、母丁香挥发油对引起三七病害的病原真菌菌丝生长具有显著的抑制活性,且在供试条件下,同一种精油对不同的病原菌的抑制效果不同。当精油浓度为50 mg/mL时,公丁香挥发油对瓜果腐霉、灰葡萄孢菌、胶孢炭疽菌、立枯丝核菌等病原菌的抑制率是100.00%,母丁香挥发油对瓜果腐霉、胶孢炭疽菌的抑制率是100.00%。4.通过对公丁香、母丁香挥发油进行GC-MS分析并确定其挥发性组分和相应的百分含量。结果表明,公丁香挥发油中丁香酚的含量最高为57.95%,其次是乙酸丁香酚酯(16.49%),石竹烯(15.89%)。母丁香挥发油含量最多的化合物是2’,3’,4’-三甲氧基苯乙酮(50.45%)和丁香酚(39.26%)。5.最小抑菌浓度(MIC)结果显示,公丁香和母丁香挥发油及其主要成分均具有显著抑菌作用,且不同挥发油及其单体化合物对病原菌的MIC值是不同的。丁香酚和乙酸丁香酯对病原菌的MIC值范围是0.04~0.42 mg/mL和0.01~0.34 mg/mL。2′,3′,4′-三甲氧基苯乙酮对病原菌的MIC值范围是0.01~1.36 mg/mL。6.为了进一步探讨挥发油与化药恶霉灵的协同增效作用,测定了挥发油与恶霉灵复配后的抑菌活性。结果表明,公丁香挥发油与恶霉灵复配后,对瓜果腐霉、灰葡萄孢菌、胶孢炭疽菌的抑制表现出协同作用,对毁坏柱孢霉的抑制表现出加和作用。母丁香挥发油与恶霉灵复配后,对胶孢炭疽菌的抑制表现出协同作用;对腐皮镰刀菌、瓜果腐霉、灰葡萄孢菌的抑制表现出加和作用。7.三七叶片活体试验结果表明,在公丁香最小抑菌浓度的处理浓度下,公丁香挥发油与恶霉灵复配后,可显著降低三七灰霉病的发病率,提高防治效果。结论:黄花蒿粗提物对三七根腐病的主要病原菌尖孢镰刀菌和腐皮镰刀菌的菌丝生长有一定的抑制作用。活体实验结果表明,当黄花蒿石油醚提取物浓度是0.50 mg/g时,处理一段时间后三七的发病率仅为25.00%,与对照组相比,发病率降低了42.22%,表明黄花蒿石油醚提取物对三七根腐病有一定的防治作用。公丁香和母丁香挥发油在离体条件下对引起三七地上和地下病害的病原菌有显著的抑制活性,通过GC-MS分析丁香挥发油的主要成分是丁香酚、乙酸丁香酯和2′,3′,4′-三甲氧基苯乙酮。最小抑菌浓度结果表明,丁香酚对病原真菌的MIC范围是0.04~0.42 mg/mL,恶霉灵对病原真菌的最小抑菌浓度是0.04~0.31 mg/mL,说明丁香挥发油的主要单体化合物丁香酚的抑菌效果与化药恶霉灵相当。此外公丁香挥发油与恶霉灵联用后对三七灰霉病的防控作用显著。
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