论文部分内容阅读
以保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌为原菌种,对其最佳生长培养条件、增菌方法、菌体富集方法、冻干工艺进行了系统的研究,构建起乳酸菌冻干发酵剂制备技术路线和工艺参数,为乳酸菌冻干发酵剂工业化生产提供依据。为了提高保加利亚乳杆菌的活菌数,对其培养条件、增殖培养基进行了研究。结果表明:其最佳培养温度为37℃;最佳接种量为3%;最适初始pH值为6.2;最佳培养方式为静置培养;最佳增殖培养基为:大豆低聚糖2.25%、葡萄糖2.00%、蛋白胨1.25%、酵母粉1.25%、番茄汁6.50%、吐温80 0.10%、磷酸氢二钾0.20%;最适收获期为16h,此时活菌数达到2.1×1011cfu/ml。为了提高嗜热链球菌的活菌数,对其培养条件、增殖培养基进行了研究。结果表明:其最佳培养温度为41℃;最佳接种量为3%;最适初始pH值为6.4;最佳培养方式为静置培养;最佳增殖培养基为:大豆低聚糖2.25%、乳糖1.00%、蛋白胨1.00%、酵母粉1.25%、番茄汁6.50%、吐温80 0.10%、磷酸氢二钾0.20%;最适收获期为16h,此时活菌数达到2.6×1011cfu/ml。对流加碱法和缓冲盐法的增菌效果进行了研究,结果表明流加碱法的效果要优于缓冲盐法。通过试验确定了在保加利亚乳杆菌培养过程中流加20%的Na2CO3溶液,在嗜热链球菌培养过程中流加15%的Na2CO3溶液来提高活菌数。对保加利亚乳杆菌的冻干工艺进行了研究,结果表明:最佳离心条件为:4000r/min10min;最佳预冻温度为-20℃,预冻时间为3h;最佳的保护剂配方为:海藻糖10.0%、甘油5.0%、吐温80 0.4%、谷氨酸钠5.0%;冻干保护剂的最佳pH值为6.5;保护剂与菌泥的最佳平衡时间为30min;保护剂与菌泥的最佳配比为4:1。在冷冻干燥过程中,菌泥厚度是影响干燥效果的重要因素;同时,含水量是影响菌粉贮存期的重要因素。通过试验确定其最佳菌泥厚度为7mm;菌粉最适含水量为2%～3%。对嗜热链球菌的冻干工艺进行了研究,结果表明:最佳离心条件为:4000r/min10min;最佳预冻温度为-20℃,预冻时间为3h;最佳的保护剂配方为:海藻糖10.0%、甘油7.5%、吐温80 0.4%、谷氨酸钠7.5%;冻干保护剂的最佳pH值为6.5;保护剂与菌泥的最佳平衡时间为30min;保护剂与菌泥的最佳配比为4:1。在冷冻干燥过程中,菌泥厚度是影响干燥效果的重要因素;同时,含水量是影响菌粉贮存期的重要因素。通过试验确定其最佳菌泥厚度为7mm;菌粉最适含水量为2%～3%。将保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌的冻干菌粉置于4℃冰箱中贮存,每隔一定时间取样测定其活菌数并计算存活率,当贮存10个月时,测定其活菌数为108cfu/g,能满足其充分发挥益生作用的条件。因此,确定其贮存期为10个月。