SFRP1基因与肺腺癌的肿瘤发生及转移的关系研究

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目的:1、研究SFRP1基因甲基化及SFRP1蛋白在肺腺癌组织中的表达。2、研究SFRP1、β-catenin和E-cadherin在肺腺癌组织中表达及三者之间的相关性。方法:1.资料:收集2015年5月至2016年5月中国人民解放军武汉总医院心胸外科手术切除肺腺癌标本60例,相应病例的癌旁组织30例。所有患者术前均未行放化疗等辅助治疗,切除的标本均由常规病理确诊。所有标本各两份,一份标本经10%福尔马林溶液固定,另一份标本离体30min内取材,放置于-80℃低温冰箱保存。患者的临床资料完整,男性37例(61.7%),女性23例(38.3%),年龄41-76岁,中位年龄为61岁。病理组织学分级:中分化和高分化腺癌34例(56.7%)、低分化腺癌26例(43.3%),有淋巴结转移21例(35.0%),无淋巴结转移39例(65.0%)。采用2009年国际肺癌研究协会(IASLC)修订的肺癌TNM病理分期标准(pTNM):Ⅰ期和Ⅱ期患者40例(66.7%),Ⅲ期患者20例(33.3%)。2.采用甲基化特异性PCR法、实时荧光定量PCR和免疫组织化学法对标本进行检测。实验所得数据我们采用SPSS 20.0统计学软件进行分析。结果:1.SFRP1基因在肺腺癌组织及癌旁组织的甲基化率肺腺癌组织与相应癌旁组织SFRP1基因甲基化率分别为58.3%和20.0%(X2=1 1.849,P=0.001)。2.SFRP1、β-连环蛋白和E-钙粘蛋白在肺腺癌组织及癌旁组织中的表达肺腺癌组织与癌旁组织中SFRP1蛋白的阳性表达率分别为38.3%和83.3%(P<0.05),β-连环蛋白异常表达率分别为75.0%和3.3%(P<0.05),E-钙粘蛋白的阴性表达率分别为58.3%和6.7%(P<0.05)。3.SFRP1mRNA、β-连环蛋白mRNA和E-钙黏蛋白mRNA在肺腺癌组织及癌旁组织的相对表达肺腺癌组织与癌旁组织中SFRP1mRNA相对表达量分别为0.847±0.297和2.019±0.445(t=4.386,P<0.01),β-连环蛋白mRNA相对表达量分别为0.883±0.167 和 0.524±0.193(t=2.818,P<0.05),E-钙粘蛋白 mRNA 相对表达量分别为 0.877 ±0.274 和 1.568±0.488(t =-2.467,P<0.05)。4.SFRP1、β-连环蛋白和E-钙粘蛋白的表达与肺腺癌患者病理资料的相关性分析肺腺癌组织中,SFRP1蛋白阳性表达率、β-连环蛋白异常表达率和E-钙粘蛋白阴性表达率与肿瘤的细胞分化程度、有无淋巴结转移情况和病理TNM分期有关(P<0.05)。5.SFRP1基因甲基化与SFRP1蛋白表达的相关性分析SFRP1基因甲基化与SFRP1蛋白阳性表达存在相关性(r=-0.585,P<0.001)。6.肺腺癌组织中SFRP1、β-连环蛋白和E-钙粘蛋白之间的相关性分析SFRP1蛋白阳性表达与β-连环蛋白的异常表达呈负相关(r=-0.495,P<0.05);β-连环异常表达与E-钙粘蛋白阴性表达呈正相关(r=0.527,P=0.001)。结论:1.肺腺癌组织中SFRP1基因甲基化率增高与SFRP1蛋白阳性表达相关(r-0.585,P<0.001),且结果提示SFRP1基因甲基化率增高及SFRP1蛋白阳性表达与肺腺癌细胞分化程度及淋巴结转移情况密切相关。2.肺腺癌组织中β-连环蛋白异常表达与SFRP1蛋白阳性表达(r=-0.585,P<0.001)和E-钙粘蛋白阴性表达(r=0.527,P=0.001)相关,且结果提示三种蛋白的不同表达程度与肺腺癌的发生及转移密切相关。
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