论文部分内容阅读
本文以广西特色林化资源—柠檬桉为原料,开展柠檬桉果实中的挥发性成分、单宁和皂苷提取研究,考察单宁、皂苷提取物和纯化物的抗氧化活性。主要内容和结果如下:(1)水蒸气蒸馏法对柠檬桉果实和花的挥发性成分进行提取,采用气相色谱质谱联用(Gas Chromatography-Mass Spectrometry technology,简称GC-MS)对其成分进行分析。柠檬桉果实挥发油的主要成分有1R-α-蒎烯(49.61%)、γ-松油烯(22.87%)、石竹烯(6.48%)等;柠檬桉花挥发油的主要成分有1R-α-蒎烯、γ-萜品烯、α-松油醇等;顶空直接进样法分析了柠檬桉果实和花的挥发性成分,柠檬桉果实挥发性成分有反式-β-罗勒烯、γ-萜品烯、3-崖柏烯等;柠檬桉花挥发性成分有反式-β-罗勒烯、γ-松油烯、1R-α-蒎烯等。并对柠檬桉果实中的脂肪酸进行提取并分析其成分,柠檬桉果实脂肪酸得率为5.11%,其中主要成分有:十八碳烯酸、十八碳二烯酸和十六烷酸等。(2)采用超声波辅助溶剂法对柠檬桉果实中的单宁进行提取,颜色和沉淀反应定性分析结果表明,它属缩合单宁,优化了柠檬桉果实单宁的提取工艺,最优提取工艺为:提取温度63.02 ℃,提取时间为44.89min,提取液乙醇浓度为47.55%,单宁得率为9.43%。采用溶剂法、大孔吸附树脂法以及两种方法联用纯化单宁粗提物,得出最佳大孔吸附树脂纯化工艺为:选用X-5型树脂,上样流速1.0 mL/min,上样浓度0.6mg/mL,洗脱剂乙醇浓度60%,洗脱流速1.5mL/min,纯化完成后,样品纯度从9.42%提高到58.52%。(3)采用超声波辅助溶剂法对柠檬桉果实中的皂苷进行提取,泡沫和颜色反应定性分析结果表明,它属三萜类皂苷,优化了柠檬桉果实皂苷的提取工艺,最优的提取工艺为:提取温度40.00 ℃,提取时间45.5 min,乙醇体积分数40.00%,在这个条件下皂苷得率为18.48%。。采用正丁醇萃取法、乙醚沉淀法和大孔吸附树脂法对粗提物进行纯化,纯化结果为正丁醇萃取物纯度为43.62%,乙醚沉淀物纯度为56.64%,大孔吸附树脂的最优纯化工艺为:D101型树脂,上样流速1.0mL/min,上样浓度0.5,洗脱流速1.5 mL/min,洗脱剂乙醇浓度80%,纯化完成后,大孔树脂纯化物的纯度为34.37%。(4)对柠檬桉果实单宁各纯化物进行抗氧化活性实验,结果表明柠檬桉果实单宁的大孔树脂纯化物总抗氧化能力是单宁酸的135.47%;各种纯化物对DPPH·有较好的清除能力,其中大孔树脂纯化物清除率达到了 92.18%;大部分纯化物对·OH自由基的清除能力都比单宁酸强,乙酸乙酯萃取后经由大孔树脂纯化的纯化物的清除率为74.61%,其次为大孔树脂纯化物为68.12%;各单宁样品的清除能力呈现出明显的剂量依赖性。(5)考察了柠檬桉果实皂苷纯化物的总抗氧化性、清除DPPH·和·OH自由基的能力,实验结果表明发现总抗氧化性大小依次为乙醚沉淀物>粗提物>正丁醇萃取物>皂苷大孔树脂纯化物>抗坏血酸,与纯化物的纯度成正比的;清除DPPH·自由基的结果为:抗坏血酸>粗提物>正丁醇萃取物>乙醚沉淀物>皂苷大孔树脂纯化物,清除率依次为:95.27%、90.07%、84.88%、83.62%和80.55%,基本与纯度成反比;对·OH的清除率的次序为:乙醚沉淀物>正丁醇萃取物>粗提物>抗坏血酸>大孔树脂纯化物,清除率依次为:81.90%、70.85%、60.79%、58.99%和 51.87%,基本与纯度成正比。大部分的纯化样品对·OH自由基的清除效果好于抗坏血酸。