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目的：研究从我室构建的抗肝癌噬菌体单链抗体库中筛选出的抗肝癌噬菌体单链抗体—scFv4-16，与肝癌患者血清的特异性结合情况，探讨其在肝癌血清学诊断中的价值。 方法：1．将抗肝癌scFv4-16由E.coli TG1转入E.coli HB2151中，IPTG诱导可溶性表达；制备大量抗肝癌scFv4-16，利用HiTrap Anti-E Tag亲和层析柱对表达的scFv4-16进行纯化；纯化后的抗肝癌scFv4-16进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，以Bradford法测定其浓度。2．采用不同浓度的抗肝癌scFv4-16及酶标二抗结合肝癌患者血清，确定最佳作用浓度；选择最适合的血清包被浓度，优化ELISA反应时间，建立最佳间接ELISA反应条件。3．采用简化的间接ELISA法分别检测抗肝癌scFv4-16与肝癌、其它消化系肿瘤、非肿瘤的慢性肝病患者血清以及正常成人血清反应的光密度值，比较阳性反应的比率；血清标本均检测AFP，加以对照。4．比较肝癌血清与抗肝癌scFv结合的阳性率与肝癌患者血清AFP的关系 5．统计本试验与AFP联合检测对肝癌诊断价值。 结果：1．制备出的抗肝癌scFv4-16纯化后，经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析可见单一蛋白条带，分子量约为31KD；纯化的单链抗体浓度为20μg／ml。2．所建立的间接ELISA方法较稳定，特异性较好，灵敏度较高。3．肝癌组与其它消化系肿瘤、非肿瘤的慢性肝病患者血清、正常成人组血清OD值比较，差异均有统计学意义。抗肝癌scFv4-16与其它消化系统肿瘤、慢性肝病、正常成人血清反应的阳性率之间的差异均无统计学意义。4．肝癌患者血清中，AFP阳性患者scFv4-16反应阳性率(12.7％)低于AFP阴性患者scFv4-16反应阳性率(37.5％)，差异有统计学意义。5．AFP诊断肝癌的阳性率为79.7％，scFv4-16为17.7％；联合检测二者诊断肝癌的阳性率为87.3％。 结论：我室制备的抗肝癌scFv4-16与人肝癌患者血清的结合具有一定的特异性，但其阳性率低于AFP，联合检测可能有助提高肝癌的诊断准确性。