骨髓间充质干细胞移植治疗实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠的实验研究

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目的:研究尾静脉注射人骨髓间质干细胞(hMSCs)移植治疗实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠的疗效及移植后hMSCs在EAE大鼠体内的生长、分布、分化状况。材料和方法:分离和纯化hMSCs。用豚鼠脑脊髓匀浆免疫Wistar大鼠制备EAE大鼠模型,分别在免疫后10d、15d、21d经尾静脉注射移植未分化的hMsCs入大鼠体内,通过电镜,动物模型神经功能评分,病理观察hMsCs对EAE大鼠的疗效,利用免疫组化方法观察移植后的hMSCs在EAE大鼠体内存活、迁徙、分化的状况。RT-PCR技术检测大鼠脊髓内MBP mRNA和PDGFα-R mRNA表达的变化,观察MSCs对EAE大鼠神经髓鞘修复的疗效。结果:免疫后10天和15天hMSCs移植组大鼠自移植后10d起其神经功能评分显著低于对照组(P<0.05);在电镜下移植组髓鞘超微结构改变明显轻于对照组;病理上各移植组在移植后10d、30d脑内脱髓鞘病灶数目明显少于对照组(P<0.05)。hMSCs移植组各时间点大鼠脑组织切片中均可见Brdu、NSE、GFAP、CNPase染色阳性细胞,CNPase(+)的少突胶质细胞比例随时间的延长而逐渐增多;移植组脊髓MBPmRNA和PDGFα-R mRNA的表达随着时间延长逐渐增强,且与对照组相比有显著升高(P<0.05)。结论:hMSCs移植能有效改善EAE动物的神经功能评分,减少脱髓鞘病灶数目,并且在体内微环境信号的影响下分化成神经元、星型胶质细胞、少突胶质细胞。目的:研究人骨髓间充质干细胞(hMSCs)移植前后实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠脑皮层神经元凋亡的状况。材料和方法:从人骨髓中分离和培养hMSCs。用豚鼠全脊髓匀浆免疫Wistar大鼠制备EAE大鼠模型,在免疫后10天经尾静脉注射移植未分化的hMSCs入大鼠体内,观察hMSCs对EAE大鼠皮层神经元凋亡的影响;免疫组化方法观察移植后的hMSCs在EAE大鼠额叶皮层存活、迁徙、分化的状况。结果:成功培养出hMSCs。hMSCs移植组各时间点大鼠额叶皮层组织切片中均可见Brdu、NSE染色阳性细胞;hMSCs移植组大鼠皮层神经元凋亡减少(P<0.05);移植后10d、30d脑内Brdu、NSE染色阳性细胞明显多于移植后2d(P<0.05)。结论:EAE大鼠脑额叶皮层神经元存在凋亡;hMSCs在体内外均有多向分化潜能,能够迁徙到EAE大鼠脑皮层分化成NSE染色阳性的神经元以替代凋亡细胞。
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