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目的:本实验通过窒息法制作大鼠心跳骤停与心肺复苏模型,研究复苏成功后,大鼠肠道屏障功能的改变,探讨诱导HO-1表达对复苏后肠道损伤的保护作用。
方法:首先建立大鼠窒息致心跳骤停与心肺复苏模型,实验动物分为四组:①假手术组(Sham)、②心肺复苏组(CPR)、③血晶素组(Hemin)—心肺复苏十血晶素、④血晶素十锌原卟啉组(Hemin+Znpp)—心肺复苏+血晶素+锌原卟啉,各复苏组又分复苏后6h及24h两个亚组。各实验组记录血流动力学数据;测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和内毒素(LPS)的含量;假手术组于术后和各复苏组于复苏后6h、24h距回盲部8cm取回肠标本,测定肠道组织匀浆丙二醛(MDA)、超氧化歧化酶(SOD)含量;制作HE病理和免疫组化片,观察病理形态学改变、回肠黏膜损伤指数和半定量分析HO-1的表达。
结果:⑴血流动力学变化。四个组基础平均动脉压(MAP)无差异(P>0.05),复苏组复苏后MAP显著低于复苏前(P<0.05),但组间比较统计学无显著性差异(P>0.05)。⑵各组血清TNF-α、LPS水平变化。复苏后6h及24h血清TNF-α、LPS水平,CPR组高于Sham组(P<0.05),Hemin组均低于CPR组及Hemin+Znpp组(P<0.05);但CPR组及Hemin+Znpp组之间比较统计学无显著性差异(P>0.05)。⑶各组大鼠肠道组织MDA、SOD表达趋势。复苏后6h及24h肠道组织匀浆MDA,CPR组高于Sham组(P<0.05),Hemin组低于CPR组及Hemin+Znpp组(P<0.05),而CPR组SOD则低于Sham组(P<0.05),Hemin组高于CPR组及Hemin+Znpp组(P<0.05),但CPR组及Hemin+Znpp组之间比较统计学无显著性差异(P>0.05)。⑷病理形态观察-回肠黏膜损伤指数。假手术组的回肠黏膜损伤指数低于其余各组各时间点(P<0.05),Hemin组6h及24h的回肠黏膜损伤指数均低于CPR组及Hemin+Znpp组(P<0.05),但CPR组Hemin+Znpp组之间比较统计学无显著性差异(P>0.05)。⑸各组大鼠肠道组织HO-1蛋白表达。复苏后6h及24h肠道组织匀浆HO-1蛋白表达,假手术组最低(P<0.05),Hemin组高于CPR组及Hemin+Znpp组(P<0.05)。
结论:①心肺复苏后大鼠肠道黏膜机械屏障受损,复苏后6h、24h均可见损伤,以24h明显。②心肺复苏后大鼠出现氧化应激、循环血中炎症因子和内毒素增加,利用血红素氧合酶-1诱导剂使其表达增加,通过其减轻氧化应激损伤、下调炎症因子,改善内毒素移位和肠黏膜上皮结构的完整性,从而减轻复苏后肠道屏障功能障碍。