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一氧化氮(NO)自由基是生物体内一种重要的气体信号分子,参与植物的多种生理过程。为了深入研究NO在果实线粒体中的氧化还原机制以及NO处理延缓冷藏果实的衰老机制,本文研究了NO对桃果实抗坏血酸-谷胱甘肽(As A-GSH)循环系统的影响,探讨了桃果实中硫氧还蛋白(Trx)的表达以及NO处理对桃果实中Trx基因表达量的影响,并利用表面等离子共振(SPR)技术检测了桃果实线粒体中的巯基亚硝基化蛋白。以肥城桃果实为实验材料,分别用NO溶液(10μmol L-1)以及c-PTIO溶液(5μmol L-1)处理桃果实,并于0°C冷藏,研究了NO对冷藏肥城桃果实抗氧化系统调控作用。研究结果表明,桃果实中丙二醛(MDA)的含量第二周仅为对照的51%。DPPH?自由基清除活性和GR分别为对照的1.3倍和1.7倍。外源NO处理的桃果实在贮存期间提高了As A/DHA比值。As A/DHA比值在第一周、第二周和第三周分别为对照的4.4、3.8和3.3倍。NO可以延缓桃果实中丙二醛(MDA)、总抗坏血酸和还原型抗坏血酸(As A)含量增加。总谷胱甘肽和还原型谷胱甘肽含量在贮存第二周后明显增加。DPPH?自由基清除活性、DHAR和GT活性第一周低于对照,第二周高于对照。外源NO处理的桃果实第二周抑制MDHAR活性,增强GR活性。结果表明,NO处理促进桃果实As A-GSH循环系统再生机制,有助于延缓冷藏桃果实衰老期。根据NCBI已公布的全长设计Trx引物,从肥城桃中提取RNA,反转录得到肥城桃Trx基因c DNA,经转染并表达纯化得到重组蛋白。c DNA全长为664 bp,目的基因长度为459 bp,共编码氨基酸153个。荧光定量PCR表明,NO处理后的果实中Trx表达量高于对照,且在处理的第二周表达量最大。通过研究发现,外源NO可以通过调节肥城桃果实基因表达量来延长肥城桃的贮藏期。利用原子力显微镜以及电化学方法表征了SPR传感器自组装分子膜的形成。基于链霉亲和素和生物素特异性结合,生物素能标记蛋白巯基等特点,运用SPR技术检测了牛血清白蛋白(BSA)亚硝基化前后变化情况以及桃果实线粒体中的巯基亚硝基化蛋白。实验结果表明90.61%亚硝基化的BSA可以被还原,说明巯基亚硝基化是可逆性反应。实际样品检测表明,15μmol L-1 NO处理桃果实引起的SPR波数变化最大,30μmol L-1 NO处理桃果实引起的SPR波数变化降低,说明高浓度的NO可能抑制线粒体蛋白巯基亚硝基化程度,这为以后进一步探讨蛋白巯基亚硝基化奠定了基础。