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研究背景和目的 慢性粒细胞白血病(CML)是起源于骨髓造血干细胞恶性增殖的克隆性疾病，可以检测出CD34抗原阳性伴BCR／ABL融合基因阳性的CML干细胞。研究表明，此类细胞有着独特的生物学特性，在CML的发病、进展及转归过程扮演着十分关键的角色，直接影响到CML患者的临床治疗效果及预后。 当前公认，除了异体造血干细胞移植(allo-HSCT)之外，STI571是阻止CML慢性期向急变期发展的最好治疗方法。但临床观察中却发现，对于那些经治疗已达CCR的患者，如果终止服药仍有可能复发。究其原因，应用实时定量PCR(Q-RT-PCR)技术检测，可以发现其体内尚仍有CML细胞残留。我们的先期研究也发现，部分经过STI571治疗已达CCR的CML患者用间期细胞荧光原位杂交法(I-FISH)检测骨髓MNC，尽管多次检测的结果均为阴性，但此时进行自体干细胞移植后仍然会复发，进一步研究这些患者发现，纯化后的CD34~+细胞中仍可以检测到较高的BCR／ABL融合基因。这些结果提示，STI571不能完全清除BCR／ABL~+-CD34~+细胞，而这些细胞将是导致CML复发的根源。 BCR／ABL~+-CD34~+细胞的生物学特性及其清除方法至今研究甚少，为此本实验旨在通过研究CML慢性期患者骨髓中CD34~+细胞伴随表达BCR／ABL融合基因和MDR-1的情况，了解其增殖动力学、抗原分化和形态学特征，及其对G-CSF作用后的变化。还研究了BCR／ABL~+-CD34~+细胞对STI571、Velcade和三氧化二砷处理的反应。 研究方法 1．采集慢性期CML患者骨髓的单个核细胞(MNC)，用免疫磁珠法纯化CD34~+细胞，用流式细胞技术检测纯化前后细胞的CD34、MDR-1表达率。同样方法采集并检测正常人CD34~+细胞作为对照。用荧光原位杂交技术检测CML患者MNC纯化前后的BCR／ABL基因表达率。 2．用不同浓度(0-1000ng／ml)的G-CSF处理CD34~+细胞，于培养第0、48、96、144小时收集细胞进行以下检测：用胎盘兰计数法检测细胞数目；用