鸡传染性支气管炎(Avian Infectious Bronchitis, IB)是由冠状病毒科、冠状病毒属的鸡传染性支气管炎病毒(Infectious Bronchitis Virus, IBV)引起的一种急性、高度接触性传染病。20世纪30年代在美国爆发以来,现在已经成为全球流行的主要禽病。IBV是单股正链RNA病毒,其基因可因点突变和重组及免疫压力发生变异,故其血清型较多,不同血清型毒株之间仅有部分或无交叉保护作用,从而给本病的防治带来困难。各地流行毒株血清型不同,由于没有一个简便、快速、特异的确定IBV血清型的方法,不能很好地了解当地IB流行株的血清型,使用的疫苗血清型与本地流行株的血清型有差异而无交叉保护’作用,造成近年来,各地养鸡场在进行了IB的常规免疫程序后,仍有IB爆发,给养鸡业造成严重的损失。所以建立一种简便、快速、实用的确定本地流行的IB的血清型的方法,并制备相应的疫苗,通过合理的免疫监测手段对鸡群的免疫水平进行实时监测迫在眉睫。HI试验具有简便、快速的特点,国际上已将IBV HI试验用于IB疫苗的免疫效果评价和抗体水平监测上,但国内长期以来没有稳定的质量可靠的IBV HI抗原,本试验系统地研究了影响IBV HI抗原制备和保存的各种条件,摸索出了制备和保存IBV HI抗原的最佳条件,并建立了IBV HA HI试验,同时利用确定的最佳条件制备了特异性的稳定的具有较高滴度的针对河南省IB地方流行株的HI抗原,且抗原制备成本低廉,为进一步应用于生产实践奠定了基础。本试验制备IBV HI抗原的最佳条件是将低代次的IBV以每胚0.1mL的注射剂量在SPF鸡胚上增殖,无菌收取尿囊液和羊水即病毒液,将病毒液即时以4,000g,50min离心,取上清,将上清在超高速冷冻离心机上以4℃30,000g,3h离心得病毒粒子,将病毒粒子用pH6.5Tris-HCL buffer充分悬浮,浓缩后体积为原病毒液的10-2,制备魏氏梭菌培养液,并将其浓缩为原液体积的10-’,将浓缩后的病毒液和浓缩后的魏氏梭菌培养液以10：4体积充分混合,置37℃水浴2h,采用1%的普通鸡红细胞和pH7.40.01MPBS,在96孔“V”形板上以25μL体系进行HA试验和病毒血凝单位的滴定,HA HI试验均在冰上进行。利用制备的IBV M41 HI抗原对河南省部分地区的IB进行了免疫效果监测,实现了IBV HI抗原的初步应用。