论文部分内容阅读
目的:初步建立裸鼠前列腺癌皮下肿瘤模型,筛选前列腺癌的血清学检测标志物。
方法:首先通过手术的方法,建立了昆明小鼠的肾包膜异种移植模型;通过培养LNCaP细胞,将细胞注射到BaLB/c-nu的皮下,建立裸鼠皮下细胞注射成瘤模型;将皮下细胞注射成瘤得到的瘤块,采用手术移植的方法,移植到BaLB/c-nu的前肢腋窝皮下,建立了裸鼠皮下瘤块移植成瘤模型。将成瘤的裸鼠血清,进行游离PSA和总PSA含量水平检测;用成瘤BaLB/c-nu血清、未成瘤BaLB/c-nu裸鼠血清作为抗原免疫同系BaLB/c免疫正常鼠,制备抗前列腺癌特异分泌蛋白抗体,将此抗体作为一抗,对LNCaP细胞甩片等做免疫组化实验,检测抗体生成情况;将成瘤BaLB/c-nu血清、未成瘤BaLB/c-nu血清、前列腺增生病人血清和前列腺癌病人血清做蛋白质电泳,以免疫实验得到的两种抗血清作为一抗,检测抗血清中抗人前列腺癌特异蛋白抗体的生成情况。
结果:BaLB/c-nu裸鼠细胞注射成瘤裸鼠血清中有很高的PSA含量;以成瘤裸鼠血清作抗原,经免疫实验后得到的抗血清;以未成瘤裸鼠血清作抗原,经免疫实验得到的抗血清,都可以使LNCaP细胞产生阳性染色,阴性对照未免疫鼠血清免疫组化结果为阴性;West Blot实验结果表明,裸鼠体内含有鼠源抗体成分。
结论:以BaLB/c-nu皮下细胞注射成瘤的裸鼠模型,其血清中可积累高浓度的PSA,以成瘤BaLB/c-nu裸鼠血清作抗原,免疫同系BaLB/c免疫正常鼠可以产生大量抗体。