凉血活血中药防治放射性肺损伤的疗效及作用机制研究

来源 :中国人民解放军军医进修学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:roadog212
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目的模拟临床放射治疗过程,建立大鼠放射性肺损伤模型,通过研究大鼠肺脏组织学改变和细胞因子的动态变化,观察放射性肺损伤的中医证候特点,评价凉血活血中药的治疗作用,并探讨其作用机制。方法取160只Wistar雌性大鼠,随机分为空白对照组、模型组、中药治疗组、单纯中药对照组(每组40只)。中药汤剂由生地、丹皮、连翘、莪术、桃仁、川芎、地龙组成。按传统煎药法煎取药液,以恒温水浴锅浓缩成含生药1.5g/ml汤剂,于照射前1周开始给中药治疗组及单纯中药对照组大鼠按18g/公斤体重灌胃给药,每日1次;其余两组给予等量生理盐水灌胃。每日观察大鼠进食、活动、大小便、皮毛、眼鼻等基本情况,每周称量体重调整给药量。模型组及中药治疗组均给予每周2次,每次3Gy右肺照射,共10次,总剂量30Gy。分别于照射开始第3、5、8、12、26周时随机选取每组大鼠各8只处死,剖胸观察胸腔及双肺大体标本情况后,取受照射肺脏,测量肺系数,经HE染色、苦味酸-天狼猩红染色观察肺脏病理改变及微观证候特点,结合病理学评分及图像分析定量评价大鼠肺损伤程度及中药疗效;经免疫组织化学染色,应用Image pro plus5.0.2软件测定TGF-β、TNF-α、IL-6、bFGF的表达,探讨中药作用机制。采用SPSS 11.0统计软件进行统计学处理。结果1、模型组大鼠表现典型放射性肺炎及肺纤维化,经测量肺系数、HE染色、胶原天狼猩红染色观察结合病理学评分及图像分析评价大鼠肺脏组织学变化程度与空白对照组存在明显差异(P<0.01)。模型在活体表现及微观病理角度反映出热伤血络与瘀血阻络的中医证候特点。2、中药治疗组大鼠仅出现轻微的急性炎症表现,大鼠发生肺纤维化程度较照射组明显减轻:急性期放射性肺组织损伤评分明显低于模型组(P<0.01),纤维化期照射区域内出现小点状局灶性纤维化,其纤维化评分明显低于模型组(P<0.01),胶原天狼猩红染色观察胶原增生及胶原比例紊乱较模型组明显降低(P<0.01)。热伤血络证及瘀血阻络证较模型组明显减轻。3、模型组大鼠TGF-β、TNF-α、IL-6和bFGF较对照组表达明显增加(P<0.01),中药治疗组在各观察点各细胞因子均低于模型组(P<0.01)。空白对照组大鼠肺组织有TGF-β、TNF-α、IL-6和bFGF的弱表达。结论1、小剂量多次照射法可以成功建立大鼠放射性肺损伤模型,病变典型,且动物无一因照射死亡,模型稳定可靠,实验可重复性好;便于观察中医证候特点,造模过程符合临床放射治疗实际,便于动态观察,更适合进行早期干预研究,实用性强。2、凉血活血中药早期干预的大鼠,其早期炎症表现和损伤程度明显减轻,炎症持续时间缩短,后期纤维化也明显减轻。动物活体、肺脏标本宏观及组织微观观察,较模型组所出现的“热伤肺络证”和“瘀阻肺络证”的表现均明显减轻。3、细胞因子TGF-β、TNF-α、IL-6和bFGF在放射性肺损伤形成及发展中,相互影响、相互作用,呈现规律性变化。凉血活血中药可抑制细胞因子TGF-β、TNF-α、IL-6和bFGF的表达,这可能是其减轻早期放射性肺炎的炎症反应,延缓及减轻放射性肺纤维化,起到防治放射性肺损伤效果的机制。
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