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白囊耙齿菌[Irpex lacteus(Fr.) Fr.]是一种药用真菌,在传统医学中用于治疗慢性肾小球炎症,其液体发酵菌丝体多糖已被开发生产“益肾康”药物。随着白耙齿菌产品临床应用的增加,其在治疗肾炎、前列腺炎方面的药用价值越来越得到认可。在扩大生产规模的过程中,白耙齿菌液体发酵和多糖提取存在生产效率低及产品作用机制不明等问题,因此迫切需要加强白耙齿菌液体深层发酵和多糖提取条件优化的系统研究,提高生产效率,同时研究其多糖的结构和作用机制,为白耙齿菌产品的应用及产品的国际化提供理论依据。 本试验主要通过野外采集标本,分离菌株,通过形态学和分子生物学进行鉴定,以确认所用菌株的正确性。对白囊耙齿菌菌丝体生长的营养需求和培养条件进行单因素试验,得到最佳培养温度为30至35°C,菌丝生长对pH不敏感,在供试pH为3-9条件下生长均较好,黑暗培养有利于生物量积累,最佳接种量为10-15%。对菌丝生长的营养需求进行研究,包括9种碳源,9种氮源,11种维生素,10种金属元素,得到最优碳、氮源、金属离子和维生素分别为可溶性淀粉,大豆蛋白胨,Ca2+和酵母提取物。正交试验优化得到最佳半合成培养基为:可溶性淀粉60 g l-1,大豆蛋白胨25 g l-1,CaCl20.6 g l-1,酵母提取物15 g l-1。生长曲线研究得到最佳发酵终止时间为6 d,发酵终止可获得的最大生物量为19.34 g l-1。复合培养基试验结果表明添加麦麸、土豆都有利于白囊耙齿菌的生物量累积。 测定了白囊耙齿菌菌丝腺苷和甘露醇的含量,腺苷含量为3.67 mg g-1,甘露醇含量为2.56%。成功用木屑栽培出白囊耙齿菌的子实体。 对白囊耙齿菌的菌丝体多糖通过透析纯化,使用DEAE-52离子交换层析,经Sephadex-G100凝胶层析纯化,最后分离得到3组组分ILPS1,ILPS2,ILPS3。高效阴离子交换色谱对ILPS1、胞外粗多糖、胞内粗多糖的单糖组分进行了分析,三者单糖组成不完全相同。ILPS1以甘露糖为主,含有少量葡萄糖胺、半乳糖和葡萄糖;胞内粗多糖和胞外粗多糖则以葡萄糖和甘露糖为主,其结构还有待进一步深入研究。