树突状细胞靶向RNA脂质体疫苗的制备及抗肝癌作用研究

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肿瘤疫苗是提取或合成肿瘤细胞相关或特异性抗原,混合免疫佐剂制备的疫苗剂型,用以激活抗原呈递细胞,淋巴细胞产生强烈的免疫反应,有效抑制肿瘤细胞的生长。
  负载肿瘤细胞RNA的纳米脂质体肿瘤疫苗能高效靶向树突状细胞并被树突状细胞吞噬内化。肿瘤RNA在树突状细胞内翻译合成肿瘤抗原,并通过内源性抗原加工提呈途径将肝癌细胞抗原呈递给CD8阳性T细胞,或通过交叉提呈途径呈递给CD4阳性T细胞,使其激活分化为特异性细胞毒性T细胞以及辅助T细胞,诱发高效的抗肝癌细胞免疫应答,有效杀伤肝癌细胞,对肝癌等肿瘤免疫治疗具有重要理论意义和潜在临床应用价值。
  本课题利用实验室构建的纳米载体系统,制备了基于肿瘤抗原RNA脂质体的纳米载体,主要研究内容如下:
  第一部分:肝癌细胞RNA脂质体纳米载体的制备及表征。采用薄膜水化法联合挤出器挤出法制备空白脂质体,提取肝癌细胞(Hepa1-6)的总RNA。制备负载肿瘤抗原RNA的肿瘤疫苗,分别对其进行表征。结果表明,获得的脂质体疫苗平均粒径为102.222±4.045nm,PDI为0.214±0.01,电位为29.967±0.611mV,比较均一,且稳定性较好。RNA脂质体疫苗的平均粒径为209.680±6.144nm,PDI为0.256±0.018,电位为42.033±0.416mV。
  第二部分:RNA脂质体疫苗体外抗肝癌作用研究。以Hepa1-6细胞为研究对象,研究了RNA脂质体疫苗对树突状细胞成熟度的影响,考察了经RNA脂质体疫苗诱导成熟的树突状细胞对T淋巴细胞的增殖作用及T淋巴细胞对肝癌细胞的杀伤效果。结果显示,RNA脂质体疫苗可以有效促进DC成熟,进一步诱导T淋巴细胞有效杀伤Hepa1-6细胞。
  第三部分:RNA脂质体疫苗体内抗肝癌作用研究。构建Hepa1-6的小鼠模型,从疫苗的治疗效果与疫苗的预防效果两个方面研究RNA脂质体疫苗体内抗肝癌作用。结果表明,RNA脂质体疫苗可以有效治疗和预防肝癌。
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