龙血竭调制大鼠脊髓背角广动力范围神经元诱发放电的药效物质

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疼痛是危及人类健康主要问题之一。在21世纪初期,随着疼痛研究的逐步深入,研发具有高效、无副作用的新型镇痛药物已经成为当今临床医学和新药开发的热点问题。本实验室根据对传统药物龙血竭镇痛效应的文献记录、临床观察,发现龙血竭产生镇痛效应的化学成分极具有开发成一种安全有效、成瘾性低的新型镇痛药物的潜能。基于上述原因,我们采用膜片钳实验技术,观察并确证了龙血竭产生镇痛作用的机制之一,即直接干预痛觉信息的传导过程;同时通过离体实验及数学理论分析对一直以来人们无法阐清的中药药效物质定义进行了严格的界定。然而仅仅通过离体膜片钳实验技术并不能充分说明龙血竭镇痛的全部药理作用机制及其药效物质。因此,我们设计在体动物实验,以进一步确证龙血竭的镇痛效应及产生这种镇痛效应的药效物质。本研究对完整的wistar雄性大鼠模型,采用微电极细胞外记录技术,观察了龙血竭、其化学成分剑叶龙血素A、剑叶龙血素B、龙血素B以及这3种化学成分按照它们在龙血竭中的百分比含量所形成的各种组合对电刺激大鼠坐骨神经诱发的脊髓背角广动力范围(wide-dynamic range,WDR)神经元放电活动的影响;并在描述药物量效关系曲线的Hill系数相异的情况下应用等效剂量的概念,建立了判断3种药物相互作用类型的零相互作用数学模型,基于这一模型和Tallarida所建立的具有不相似的量效关系的两种药物的零相互作用数学模型,确定了3种化学成分在不同的组合方式下调制脊髓背角广动力范围神经元放电活动时的相互作用类型。结果表明,(1)龙血竭及其3种化学成分均对电刺激坐骨神经诱发的脊髓背角广动力范围神经元的诱发放电频率具有浓度依赖的抑制作用,且达到的最大抑制效应相同,但三种化学成分量效曲线的Hill系数各不相同。(2)3种化学成分的各种组合中只有剑叶龙血素A、剑叶龙血素B、和龙血素B的分子有效组合能够产生与龙血竭类似的抑制效应,但在所产生的对诱发放电频率抑制相等时,三种化学成分单独作用时各自所需的浓度高于组合作用时所需的浓度。(3)剑叶龙血素A与剑叶龙血素B、剑叶龙血素A与龙血素B、剑叶龙血素B与龙血素B在联合调制电刺激坐骨神经诱发脊髓背角广动力范围神经元放电频率时具有拮抗作用,而剑叶龙血素A、剑叶龙血素B和龙血素B在联合调制电刺激坐骨神经诱发的脊髓背角广动力范围神经元的放电频率时具有协同作用。上述结果说明,(1)龙血竭及其调制初级感觉神经元钠通道的药效物质——剑叶龙血素A、剑叶龙血素B、龙血素B的三种化学成分的分子有效组合,也能在脊髓水平上干预痛觉信息的传导和加工;(2)龙血竭在脊髓水平上调制痛觉信息,也是龙血竭产生镇痛效应的原因之一。(3)3种化学成分以协同方式既调制初级感觉神经元河豚毒素不敏感型钠通道又抑制脊髓背角广动力范围神经元的放电频率进一步证实了3种化学成分有效组合是构成龙血竭镇痛效应的药效物质。
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