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目的:血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMC）增殖是高血压、动脉粥样硬化、血管成形术、特别是经皮冠状动脉介入治疗术后再狭窄等多种心血管疾病的共同病理特征。VSMC在各种外界刺激的作用下,细胞外信号经过细胞内信号传递系统到达核内,诱导一系列与VSMC增殖相关的基因表达,启动细胞周期,从而推动VSMC分裂、增殖。在此过程中,细胞与细胞之间的缝隙连接（gap junction,GJ）及连接蛋白（connexins,Cxs）起着非常重要的作用。目前,在血管水平上被鉴定的连接蛋白有Cx43、Cx40和Cx37。已有研究发现,不同原因造成的血管平滑肌细胞的增殖均有Cx43表达的增加。血管紧张素Ⅱ（angiotensin Ⅱ, AngⅡ）能刺激培养的大鼠心肌细胞Cx43的表达。本研究拟探讨各种原因（球囊损伤模型以及高脂饮食动脉粥样硬化模型）造成血管平滑肌增殖时是否存在Cx43和Cx40表达的改变,血管紧张素转换酶抑制剂（angiotensin-converting enzyme inhibitor, ACEI）和血管紧张素受体1（Angiotensin Ⅱ Type 1 Receptor., AT1R）浙江大学博士学位论文拮抗剂能否减少各种原因造成血管平滑肌增殖时平滑肌细胞间过度的cx43mRNA和蛋白的表达,以及ACEI和ATIR拮抗剂能否引起Cx4O的mRNA和蛋白表达的改变。方法:1、制作球囊损伤骼动脉家兔模型:将35只家兔随机分为正常对照组、假手术 组、球囊损伤组、球囊损伤十氯沙坦组、球囊损伤+雷米普利组。术后第二天 起,后2组分别在饮食中加入氯沙坦IOmg/k岁d、雷米普利0.5m留kg/d,喂养 14天后处死取骼动脉标本,在分组后及处死前分别抽静脉血测定血浆胆固醇 浓度。2、制作高脂饮食早期动脉粥样硬化模型:将28只家兔随即分为正常对照组、高 脂饮食组、高脂饮食+氯沙坦组及高脂饮食+雷米普利组。除正常对照组外, 其余3组均喂以高脂饮食8周,后2组同时分别在饮食中予氯沙坦和雷米普利 （剂量同前）,8周后处死,抽静脉血测定血浆胆固醇浓度,取腹主动脉标 本。 3、所有标本均作病理切片,行HE染色及Cx43、Cx40蛋白的免疫组化观察;同 时在透射电子显微镜下直接观察细胞间缝隙连接结构变化;以Western blot法 对Cx43及Cx4O蛋白表达进行半定量测定;用RT一PCR法对Cx43及Cx4O mRNA表达进行半定量测定。结果:1、球囊损伤模型:正常对照组和假手术组Cx43、Cx40的蛋白表达量无差异 （尸>住05）,球囊损伤组Cx43、Cx40蛋白表达量较正常对照组和假手术组明 显增加（尸<0.01）,虽然氯沙坦组和雷米普利组Cx43 mRNA和蛋白的表达量 仍高于正’.9J’对照组和假手术组（P<0.01）,但明显低于球囊损伤组,有统计学浙江犬学博士学位论文 差异（尸<0.05或尸<0.01）,氯沙坦组和雷米普利组两组之间Cx43 mRNA和蛋 白表达量无显著差异（P>0.05）。氯沙坦组和雷米普利组Cx40 mRNA和蛋白 表达量与球囊损伤组相比无明显差异（P>0.05）。免疫组化结果显示,正常对 照组和假手术组血管平滑肌细胞及内皮细胞均有Cx43及Cx40的蛋白表达,但 表达均较低:球囊损伤组新生内膜处Cx43及Cx40的表达均较正常对照组和假 手术组明显增强,而球囊损伤组新生内膜处有大量的Cx43及Cx4O的表达,较 正常对照组和假手术组明显增强,而中膜平滑肌间Cx43及Cx40的表达与正常 对照组和假手术组比较无明显差异;但仍高于正常对照组和假手术组,且2组 之间均无明显差异。氯沙坦组和雷米普利组新生内膜处Cx43的表达比球囊损伤 组相比明显降低,而氯沙坦组和雷米普利组新生内膜处Cx4O的表达与球囊损伤 组相比无明显差异。透射电子显微镜结果显示,在增殖的平滑肌细胞间存在较 多的、并且体积较大的缝隙连接结构,并可见较多的胶原纤维。2、高脂饮食早期动脉粥样硬化模型:高脂饮食组Cx43、Cx4O mRNA及蛋白表达 量均较正常对照组组明显增加（尸<0.01）,虽然氯沙坦组和雷米普利组Cx43 mRNA及蛋白表达量仍高子正常对照组（尸<0.05或尸<0.01）,但明显低于高脂 饮食组,有统计学差异（尸<0.05或尸<0.01）,并且氯沙坦组和雷米普利组二组 之间Cx43 mRNA及蛋白表达量无显著差异（尸>0.05）。氯沙坦组和雷米普利 组Cx40 mRNA及蛋白表达量与高脂饮食组相比无明显差异（尸>0.05）。免疫 组化结果显示,正常对照组血管平滑肌细胞及内皮细胞均有Cx43及Cx40的蛋 白表达,但表达均较低;高脂饮食组新生内膜处Cx43及Cx40的表达均较正‘.%’ 对照组明显增强,中膜平滑肌间Cx43及Cx4O的表达也略高于正常对照组:而 氯沙坦组和雷米普利组新生内膜处Cx43的表达均比高脂饮食组显著减弱,但仍 高于正常对照组,而氯沙坦组和雷米普利组新生内膜处Cx4O的表达与高脂饮食 组相比无明显差异。透射电子显微镜结果显示,在增殖的平滑肌细胞间存在较 多的、并且体积较大的缝隙连接结构,并可见较多的胶原纤维。