激光灸预处理对荷瘤小鼠细胞免疫的影响研究

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目的:观察激光灸预处理对Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长、转移和免疫功能的影响,探索激光灸预处理的抗肿瘤免疫效应机制,为灸法在预防肿瘤发生中的推广应用提供科学依据。方法:将C57/BL6小鼠随机分为空白组、模型组、预灸组。对预灸组小鼠进行预处理,给予双侧“足三里”、“关元”穴红外激光灸照射,连续15日。通过Lewis肺癌细胞培养传代技术进行肿瘤细胞培养,对模型组和干预结束的预灸组小鼠进行皮下接种造模。于小鼠右上肢内侧接种肿瘤细胞,待肿瘤生长至长径为0.5cm,视为造模成功。成模后,隔天测量小鼠肿瘤体积。成模后第16日,处死小鼠。(1)取小鼠眼球血,离心后取血清,酶联免疫法测定细胞因子VEGF、IFN-γ含量;(2)取小鼠肺组织,置于4%多聚甲醛中固定,经石蜡包埋切片,HE染色,观察肺部转移灶;(3)完整剥离小鼠脾脏和肿瘤,称重,计算脾脏指数;(4)运用流式细胞术法测定脾脏、肿瘤组织中T细胞及其亚群、NK细胞、NKT细胞含量。结果:(1)与空白组相比,预灸组、模型组小鼠血清中血管内皮生长因子(VEGF)含量明显升高(P﹤0.01);与模型组相比,预灸组小鼠血清中VEGF含量明显降低(P﹤0.01)。与空白组相比,模型组小鼠血清中干扰素-γ(IFN-γ)含量明显降低(P﹤0.01),预灸组小鼠血清中IFN-γ略有降低,无统计学意义;与模型组相比,预灸组小鼠血清中IFN-γ含量明显升高(P﹤0.01)。(2)模型组肺组织出现明显的肿瘤异型性组织,肿瘤细胞密集程度高;预灸组肺组织染色偶见呈不规则形状细胞核的类癌细胞,未见明显肿瘤异型性组织。(3)与空白组相比,荷瘤小鼠的脾脏指数明显升高,模型组(P﹤0.05),预灸组(P﹤0.01);与空白组相比,预灸组、模型组小鼠脾脏组织中T细胞含量、CD4+T细胞含量均明显降低(P﹤0.05);与空白组相比,模型组小鼠脾脏组织CD8+T细胞含量明显降低(P﹤0.05),预灸组小鼠脾脏组织CD8+T细胞含量略有降低,无统计学意义。(4)与模型组相比,预灸组小鼠肿瘤组织中CD4/CD8比值明显升高(P﹤0.05)。结论:(1)激光灸预处理可降低Lewis肺癌模型小鼠血清中VEGF表达、升高血清中IFN-γ表达,一定程度上抑制肿瘤转移。(2)Lewis肺癌荷瘤小鼠免疫功能明显降低。(3)激光灸预处理对免疫功能有一定调节作用。
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