论文部分内容阅读
目的 对大肠癌组织中E-cd和β-cat的表达进行检测研究,旨在探讨二者的表达与大肠癌的临床病理特征及其预后的关系。 材料与方法 一、实验材料: 1、病例标本: 取1996年1月至6月辽宁省肿瘤医院大肠外科139例大肠癌手术标本石蜡块,另取外科手术切除的大肠标本中距肿瘤10cm以上的正常大肠粘膜15例。 2、试剂: 鼠抗人E-cd单克隆抗体;鼠抗人β-cat单克隆抗体;SP试剂盒。 3、主要仪器: 切片机;冰箱;温箱;微波炉;显微镜(Olympus BX-41)。 二、免疫组化方法(S-P法): 采用免疫组化法(S-P法)检测大肠癌及正常大肠粘膜组织中E-cd和β-cat蛋白的表达。设定正常大肠粘膜为阳性对照,大肠癌石蜡切片上癌旁正常大肠粘膜作为阳性内对照,用PBS液代替一抗作阴性对照。判断标准:将大肠癌组织染色结果与正常大肠粘膜组织染色结果进行比较。棕黄色细颗粒着色为阳性表达。正常的E-cd和β-cat表达均定位于细胞膜,呈棕黄色的阳性表达。每张癌组织切片在光镜下计数5个高倍视野,每高倍视野计数100个细胞,计算平均阳性表达细胞比例,进行判断: (1)、细胞膜阳性表达的细胞比例290%为正常表达; (2)、细胞膜阳性表达的细胞比例<90%或无表达、细胞浆和/或细胞核的异位表达均为异常表达。 三、数据及图片处理: 使用统计学软件SPSS10.0统计、制图。免疫组化结果显微照像摄片。 结 果 研究结果显示E-Cd,β-C8t在正常大肠粘膜组织中的表达均表现为细胞膜的棕黄色阳性表达。而在多数大肠癌组织中,E-cd、β-cat存在不同程度的细胞膜异常表达,且β-cat呈细胞浆和/或细胞核的异位表达。在被检测的139例大肠癌组织中S-Cd. p-C8t异常表达为97例(69.8啪)及105 例(75.5%)。在p-cat异常表达的105例中,98例门.5%)为p-cat细胞膜异常表达,93例N6.9%)为p-cat细胞浆异常表达,另外有31例K2·3%)为 p-cat细胞核异常表达。统计分析显示 E-cd异常表达率与大肠癌分化程度呈负相关卜s=-0.228,P=0.02人与淋巴结转移及 Dukes分期呈正相关仁s=0.158,0.176;P=0.off,0刀10人p-cat异常表达率只与大肠癌分化程度呈负相关卜产一0.215;P二 0.003人应用 Kavlan-Meter法绘制生存曲线,并用og-act检验,结果显示z-ca异常表达和p-cat异常表达均与大肠癌病人的生存率有统计学相关性,E-Cd异常表达组生存率明显较E-cd表达正常组低,同样p-cat异常表达组生存率也明显较p-C&t表达正常组低,提示E-Cd及p-Cat异常表达与预后不良相关。应用COX回归模型进行多因素生存分析显示E一cd表达异常和p-cat表达异常不能成为大肠癌的独立预后因素。 ·2· 结 论 E-cd-cat复合物在细胞间的粘附系统中起很重要的作用,E-cd和p-cat的异常表达与大肠癌的侵袭和转移相关,且二者的异常表达与大肠癌的预后相关。