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受精卵在子宫腔以外着发育床称为异位妊娠,包括输卵管妊娠,宫颈妊娠,宫角妊娠,腹腔妊娠,其中以输卵管妊娠最常见。近年来,由于人工流产手术增多,患者趋于年轻化,有不洁的性生活、盆腔感染史和盆腔手术史患者增多,异位妊娠发病率明显增加,据资料统计,异位妊娠发病率占所有已知怀孕总数的1%以上。其中,未婚、未生育患者也明显增加。随着现代检测技术的进步和妇科医生对本病警惕性的提高,输卵管妊娠的早期诊断率已大大提高,为非手术治疗创造了条件,使得这部分患者避免了因手术而引起身体创伤和经济压力,同时最大限度的保留了患者的生育能力。非手术治疗中,中医药治疗现已广泛应用于临床。中医认为,异位妊娠的发病机理是少腹血瘀证,治疗上采取活血化瘀、消癥杀胚为法。自山西中医学院第一附属医院首先使用宫外孕Ⅰ号、Ⅱ号方保守治疗异位妊娠以来,各地在宫外孕Ⅰ号、Ⅱ号方的基础上临证加减,均取得了较好的疗效。然而,中医药治疗异位妊娠的治法、方药、疗效等虽屡见报导,但对中药治疗的作用机理研究尚处于初级阶段,多数研究仅停留在血液流变学的层次上,没有特异性的、系统层次的研究说明其作用靶点及其作用机理。1.基础实验研究目的本实验拟通过高效液相--质谱(HPLC-MS)联合分析方法,作为血清药理学运用的质控方法,证明灌服中药后的大鼠含药血清中中药成分群的存在。并从雌孕激素受体及基质金属蛋白酶方面探讨化瘀消癥杀胚中药复方(宫外孕Ⅰ号方加味)对输卵管妊娠滋养细胞靶器官的作用机制。研究方法拟采用高效液相一质谱(HPLC-MS)联合分析方法,对灌服中药复方后的SD大鼠血清及空白SD大鼠血清进行检测。用经质控证实含有化瘀消癥杀胚中药成分群的大鼠含药血清,对符合纳入条件的输卵管妊娠患者的输卵管妊娠滋养细胞进行体外培养,并分别设MTX对照组及空白对照组进行体外培养。采用实时荧光定量(Real-time PCR),测定化瘀消癥杀胚中药复方对与输卵管妊娠相关的调节因子ER、PR、MMPs表达的影响,从分子基因水平上探讨化瘀消癥杀胚中药复方对输卵管妊娠滋养细胞靶器官的可能作用机制。研究结果(1) LC-MS/MS法检测化瘀消癥杀胚中药复方给药血清的药物成分在灌服化瘀消癥杀胚中药复方后的SD大鼠血清中找到瓜氨酸、β β-二甲基丙烯酰阿卡宁、丹参酮ⅡA、丹酚酸B、苦杏仁苷、芍药苷。而甲氨喋呤组和生理盐水组的含药血清中不含有上述任何一种药物成分。(2)化瘀杀胚中药复方对输卵管妊娠滋养细胞ER、PR、MMPs的影响①中药中剂量组和甲氨喋呤组能显著下调ER的表达。甲氨喋呤组与生理盐水组相比,ER的表达更低,差异具有显著统计学意义(P<0.01)；中药中剂量组与生理盐水组相比,ER的表达更低,差异具有统计学意义(P<0.05)；甲氨喋呤组与中药中剂量组相比,ER的表达略低,差异无统计学意义(P>0.05)。②中药中剂量组和甲氨喋呤组能显著下调PR的表达。甲氨喋呤组与生理盐水组相比,PR的表达更低,差异具有显著统计学意义(P<0.01)；中药中剂量组与生理盐水组相比,PR的表达更低,差异具有显著统计学意义(P<0.01)；甲氨喋呤组与中药中剂量组相比,PR的表达略低,差异无统计学意义(P>0.05)。③中药中剂量组和甲氨喋呤能显著上调MMPs的表达。甲氨喋呤组与生理盐水组相比,MMPs的表达明显上升,差异具有显著统计学意义(P<0.01)；中药中剂量组与生理盐水组相比,MMPs的表达上升,差异无统计学意义(P>0.05);甲氨喋呤组与中药中剂量组相比,MMPs的表达上升,差异无统计学意义(P>0.05)。2.临床研究目的研究异位妊娠妇女的体质类型分布,以正常未孕妇女作为对比,探讨异位妊娠患者体质类型分布特点,以及异位妊娠发生的高危体质,为今后通过中医药干预和调节育龄期妇女孕前体质,降低异位妊娠的发病率作前期研究。研究方法对2011年1月至2012年3月在广州中医药大学第一附属医院妇科住院的异位妊娠病人,并以正常未孕妇女作对照,根据王琦教授设计的九分法中医体质调查表,进行现场问卷调查。研究结果(1)病例收集：对住院的异位妊娠患者共发放调查问卷178份,入院诊断为异位妊娠者经初步排查后发放调查问卷,根据出院诊断再次筛查,剔除诊断不明者及合并有其他疾病者,最后收集有效病例159份。正常未孕妇女组共收集122例。(2)在159例异位妊娠患者当中,阳虚质居多,其次为气郁质和瘀血质。经LogistiC回归分析,对异位妊娠的发生有显著影响的变量有瘀血质和湿热质(P<0.01)。研究结论1. LC-MS/MS法检测化瘀消癥杀胚中药复方含药血浆药物成分的实验证实,中药含药血清中含有上述化瘀消癥杀胚的中药成分。这些成分可能是化瘀消癥杀胚中药治疗输卵管妊娠的药效基础。2.化瘀消癥杀胚中药复方能降低ER、PR的表达,表明其能从受体水平拮抗雌孕激素,导致绒毛组织变性、坏死。是其发挥消癥杀胚效应的作用机制之一。3.化瘀消瘤杀胚中药复方能上调MMPs的表达,加速输卵管蜕膜的溶解,导致蜕膜组织变性、坏死。也是其发挥消瘤杀胚效应的作用机制之一。4.血瘀质、湿热质等是异位妊娠发病的相关因素,其中,瘀血质与正常非孕期妇女相比有显著差异。5.异位妊娠患者的体质多为虚实夹杂。