【摘 要】
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本文旨在应用超声介导微泡破裂转基因的方法，研究体内外抗肿瘤作用的效果及可行性，为肿瘤的基因治疗提供新的思路。首先以声诺维(SonoVue)微泡作为转基因载体，pcDNA3／IFN-γ质粒
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本文旨在应用超声介导微泡破裂转基因的方法，研究体内外抗肿瘤作用的效果及可行性，为肿瘤的基因治疗提供新的思路。首先以声诺维(SonoVue)微泡作为转基因载体，pcDNA3／IFN-γ质粒为治疗基因，体外通过超声介导微泡破裂法转基因作用于人肝癌细胞株SMMC-7721，锥虫蓝染色法检测细胞的安全性，ELISA法检测细胞培养上清IFN-γ的表达水平，流式细胞术(FCM)检测转基因后细胞周期变化。结果表明，超声微泡转基因组的细胞存活率与对照组无差别，细胞上清中IFN-γ有较高表达，实验组的细胞凋亡比例明显高于无微泡对照组。然后以SMMC-7721细胞接种至裸鼠皮下成瘤，以pcDNA3／IFN-γ质粒为靶基因，比较有无超声或微泡及联合作用时抗肿瘤效果，治疗结束后，ELISA及免疫组化法分别检测血清和瘤组织的IFN-γ的表达，并比较瘤重、瘤体积及瘤组织的变化，结果表明，超声微泡转基因组的移植瘤体积及瘤重较其他组增长最小(F=27.753，p＜0.01)；瘤组织中IFN-γ的表达及血清中IFN-γ的水平最高(F=88.969，p＜0.01)；组织学显示移植瘤有片状坏死和炎细胞浸润。再建立经SD大鼠门静脉置管动物模型，以虫荧光素酶基因为报告基因，观察输入不同浓度的SonoVue微泡作为载体促进虫荧光素酶基因在肝脏中的表达强度与持续时间，并检测基因转染前后的肝肾功能，并取肝、肾组织常规HE染色行组织学检查。结果表明：随着微泡浓度的增加，虫荧光素酶基因表达逐渐增加，呈量效关系，并有较
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