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人乳是最安全和最经济的婴儿食品，含有婴儿生长发育所必须的全部营养物质，在增强婴儿抵抗力、促进组织生长发育等多方面发挥着重要的生物学功能。目前，我国6个月以下婴儿母乳喂养率不足40%，有60%以上的婴儿需要配方食品来为他们提供营养物质，再加上幼儿的需求，致使婴幼儿配方乳的市场需求巨大。因此，开展人乳蛋白组分的研究，对于婴幼儿配方乳品的研制具有重要的现实意义。相关产品的问世也将有效解决我国母乳喂养不足的问题。本研究以新鲜的中国人乳为研究对象，通过离心脱脂，调节等电点沉淀蛋白，使得酪蛋白解离出来，对所得酪蛋白进行阴离子交换层析，分离出β-酪蛋白，并且β-酪蛋白被完全纯化出来。通过Western-Blot和基质辅助激光解吸附电离子串联飞行时间质谱法（MALDI-TOF/TOF MS）分别对分离洗脱液进行鉴定，证明β-酪蛋白能被成功的分离出来。主要研究工作和结论如下：1．在酸性条件下添加氯化钙进行分离，从pH值、离心力、CaCl2溶液浓度，三个方面对分离效果进行评价，经过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）法测定分离效果。结果表明：当pH=4.3，离心力为40000g，CaCl2溶液浓度60mmol/L时，分离得到的酪蛋白组分纯度最高。2．人乳酪蛋白沉淀通过DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析分离，对洗脱液进行SDS-PAGE电泳鉴定，初步判定，峰Ⅲ是人乳β-酪蛋白，其纯度高于90%。3．对分离出的洗脱液峰Ⅲ进行Western-Blot鉴定，结果表明：洗脱液峰Ⅲ能与兔抗人β-酪蛋白抗体特异性结合，确认其为人乳β-酪蛋白。4．对分离出的洗脱液通过MALDI-TOF/TOF MS对其进行鉴定，并在Mascot数据库进行数据检索，序列覆盖率为50%，进一步确定经DEAE阴离子交换分离出的洗脱液为人乳β-酪蛋白。