小鼠脑缺血再灌注后地塞米松对海马CA1区神经细胞形态学的影响

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目的:进一步验证脑缺血再灌注损伤实验动物模型的可行性,初步探讨地塞米松再灌注后干预对脑缺血再灌注损伤的影响,探索脑缺血再灌注损伤时地塞米松后干预的最佳时机。 方法:健康昆明小鼠54只,雌雄各半,质量20±2克。按随机数字表将小鼠分为9组,每组6只,分别为假手术组(Ⅰ),仅游离双侧颈总动脉;生理盐水对照4组(N1,N2,N3,N4),丝线结扎双侧颈总动脉,1 h后松开,再灌注0h,0.5h,1h,1.5h后经尾静脉分别给予相当量的生理盐水;地塞米松干预4组(D1,D2,D3,D4):丝线结扎双侧颈总动脉,缺血1 h后松开,再灌注0h,0.5h,1h,1.5h后经尾静脉分别给予地塞米松10mg/kg。以上9组均采取再灌注24h后断头取脑。用中性甲醛溶液固定24h,取视交叉到乳头体后部之间的脑组织,然后进行常规脱水,浸蜡,透明,包埋.切片厚度5um,每脑取视交叉后平面片2张,行HE染色。在有测微尺显微镜(×10)的光镜下,盲法计数海马CA1区100um范围内核完整的锥体细胞数(自CA1区始点起)。实验数据以均数±标准差(x±s)表示,生理盐水组组间比较采用单因素方差分析;假手术组与生理盐水组比较用两样本t检验:地塞米松4组与生理盐水4组比较用析因设计分析。 结果:生理盐水组组间比较,P>0.05,无统计学意义;生理盐水组与假手术组比较,两样本t检验结果显示:方差齐,具有统计学差异,P<0.001;生理盐水组与地塞米松组比较,方差分析检验结果显示,时间的主效应具有统计学意义,P<0.001,随着时间的延长,正常细胞数逐渐降低;分组效应具有统计学意义,P<0.001,地塞米松组与生理盐水组具有统计学差异;时间与分组的交互作用,P<0.001,地塞米松组与生理盐水组的差异,随着时间的增加逐渐降低。 结论:在脑缺血再灌注后早期给予大剂量地塞米松可明显改善脑细胞的损伤,而且用药越早越好。
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