疏肝和胃汤水提醇沉液治疗肝郁脾虚功能性消化不良作用机制的实验研究

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目的:通过考察疏肝和胃汤水提醇沉液对正常大鼠胃肠功能的影响及肝郁脾虚功能性消化不良(FD)模型大鼠的胃肠功能、MTL、GAS及Ghrelin的影响,筛选出最佳的醇沉浓度。考察最佳醇沉浓度对肝郁脾虚FD模型大鼠的相关激素水平及蛋白表达的影响,探讨其治疗肝郁脾虚FD的作用机制,为疏肝和胃口服液的开发及临床应用提供一定的科研依据。方法:以正常大鼠的胃内残存率和小肠推进率为指标,筛选出醇沉浓度30%、50%、80%中较佳的醇沉浓度。采用饮酸+夹尾刺激+不规则饮食复制肝郁脾虚FD大鼠模型,观察较佳的醇沉浓度的疏肝和胃汤水提醇沉液对模型大鼠的胃肠动力、MTL、GAS及Ghrelin的影响,筛选出最佳的醇沉浓度。最后考察最佳的醇沉浓度对肝郁脾虚FD模型大鼠胃肠功能、血清SP、CCK、5-HT、ET-1、NO、Ghrelin、AChE水平的影响,分别以Western Blot法及免疫组化法测定大鼠胃窦Ghrelin蛋白、5-HT蛋白的表达。结果:1.疏肝和胃汤水提醇沉液醇沉浓度为30%、55%及80%对正常大鼠胃肠动力的影响:与正常对照组比较,55%醇沉组及80%醇沉组均能显著降低大鼠的胃内残存率(P<0.05),80%醇沉组能显著提高大鼠的小肠推进率(P<0.05)。2.较优醇沉浓度疏肝和胃汤水提醇沉液对肝郁脾虚FD大鼠的胃肠动力、MTL、GAS及Ghrelin的影响:(1)体重:造模两周后模型组(M组)大鼠与正常对照组(A组)大鼠比较,体重明显下降(P<0.01)。造模结束后正常饲养模型对照组(B组)大鼠体重仍明显低于A组(P<0.01)。给药一周后与B组比较,除莫沙必利组(C组)大鼠体重无显著差异外(P>0.05),55%醇沉组(D组)、80%醇沉组(E组)大鼠体重均显著增加(P<0.01,P<0.05)。给药两周后,C、D、E三个治疗组大鼠体重均明显高于B组(P<0.05,P<0.05,P<0.01),与A组大鼠体重均无统计学差异(P>0.05)(2)胃肠动力、血清MTL、GAS及Ghrelin水平:与A组比较,B组大鼠胃内残存率显著增加(P<0.01),小肠推进率、血清MTL、GAS及Ghrelin水平显著降低(P<0.01)。与B组比较,D、E两组胃内残存率均显著降低(P<0.01),小肠推进率(P<0.01)、血清MTL (P<0.01)、GAS (P<0.01)及Ghrelin(P<0.05,P<0.01)水平均显著增加。与C组比较,D组胃内残存率显著增加(P<0.01),血清Ghrelin显著降低(P<0.01),小肠推进率、血清MTL、GAS水平无显著差异(P>0.05);E组各项指标与C组均无统计学差异(P>0.05)。3.疏肝和胃汤水提80%醇沉液对肝郁脾虚FD大鼠的机制研究(1)体重:造模两周后模型组(M组)大鼠与正常对照组(Ⅰ组)大鼠比较,体重明显下降(P<0.01)。造模结束后正常饲养模型对照组(Ⅱ组)大鼠体重仍低于正常对照组(P<0.01)。各治疗组大鼠,在给药一周后,莫沙必利组(Ⅲ组)和疏肝和胃组(Ⅳ组)大鼠体重与Ⅰ组比较均明显降低(P<0.01)。给药两周后,Ⅳ组大鼠体重较Ⅱ组显著增加(P<0.01),与Ⅰ组大鼠体重比较均无统计学差异(P>0.05);Ⅲ组大鼠体重显著低于Ⅰ组(P<0.05),与Ⅱ组无统计学差异(P>0.05)(2)胃肠动力、血清SP、CCK、5-HT、ET-1、NO、Ghrelin、AChE水平及胃窦Ghrelin、5-HT蛋白表达:与Ⅰ组比较,Ⅱ组大鼠胃内残存率显著增加(P<0.01)小肠推进率显著降低(P<0.01),血清SP、CCK、5-HT、Ghrelin水平显著下降(P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.05),血清NO、AChE水平显著升高(P<0.05),胃窦Ghrelin蛋白表达趋势降低,但无统计学差异(P>0.05),胃窦5-HT蛋白表达显著下降(P<0.05)。与Ⅱ组比较,Ⅳ组大鼠胃内残存率、血清NO、AChE水平显著降低(P<0.01,P<0.05,P<0.05),小肠推进率、血清SP、CCK、-HT、Ghrelin水平均显著增加(P<0.05,P<0.01, P<0.01, P<0.05, P<0.05),胃窦Ghrelin、5-HT蛋白表达上调(P<0.05)。与Ⅲ组比较,Ⅳ组大鼠血清SP、CCK水平显著升高(P<0.01, P<0.05), Ghrelin水平显著下降(P<0.05)。四组实验大鼠的血清ET-1水平无统计学差异(P>0.05)。Ⅲ组大鼠胃窦Ghrelin蛋白表达显著高于Ⅳ组(P<0.01),两组大鼠胃窦5-HT蛋白无统计学差异(P>0.05)。结论:1.醇沉浓度为55%和80%的疏肝和胃汤水提醇沉液均可促进正常大鼠的胃肠动力。2.两次实验均采用夹尾+饮酸+不规则饮食复制肝郁脾虚FD大鼠模型,结果表明该方法是稳定可行的。3.醇沉浓度为55%和80%的疏肝和胃汤醇水提醇沉液均能增强肝郁脾虚FD模型大鼠的胃肠动力,上调血清MTL、GAS及Ghrelin水平,醇沉浓度为80%疗效优于55%。4.疏疏肝和胃汤水提醇沉液治疗肝郁脾虚FD可能的作用机制是通过上调相关脑肠肽(MTL、SP、CCK、5-HT、Ghrelin)水平,兴奋胆碱能神经,调节胃肠平滑肌运动,起到增强胃肠动力的作用;通过影响运动神经元神经递质(ACh、SP、NO)的分泌平衡来调节内在经系统,从而使内在神经系统与自主神经系统来共同调节消化道系统的平衡;通过调节相关激素(ACh、GAS)来调节胃内酸碱环境。
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