蔬菜主要病害生防菌株CAB-1发酵工艺的优化

来源 :河北大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huangsheng200888
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生防菌株CAB-1是河北农林科学院植物保护研究所植物病害生物防治试验室分离保存的一株生防细菌,该菌株对黄瓜白粉病、黄瓜灰霉病、番茄灰霉病和番茄叶霉病等蔬菜主要叶部病害均有较好的防效。本研究中所使用的黄瓜白粉病病原菌经形态学鉴定为单丝囊壳属(Sphaerotheca fulginea)。本研究建立了黄瓜白粉病的生测体系,即通过选择适当培养基质和黄瓜感病品种,在子叶完全展开时喷雾接种生防菌株CAB-1发酵液,24 h后用喷雾法接种黄瓜白粉菌分生孢子悬浮液,孢子浓度为3×105/ml -5×105个/ml,25℃-34℃的温室培养,湿度保持在45%-75%之间,7天对照处理发病全部达到9级时,调查各处理病情并计算防效。通过CAB-1菌株在16种发酵培养基中的发酵液对黄瓜白粉病的防治效果进行比较,试验结果表明:2号培养基培养该菌株的无菌体培养液对黄瓜白粉病的防效优于其他培养基。对2号培养基对菌株CAB-1的发酵条件进一步优化,结果表明,25℃、初始pH值7、转速180 r/min、接种量1%、装液量100 ml/250 ml、培养时间48 h,所得无菌体培养液对黄瓜白粉病的防效最高,是2号培养基的最佳发酵条件。以黄瓜灰霉菌为靶标,用生防菌株CAB-1无菌体培养液制成含药PDA平板,比较了16种发酵培养基无菌体培养液对黄瓜灰霉菌的抑制作用。结果表明,4号培养基能够产生抑菌物质完全抑制番茄灰霉菌的生长,是菌株CAB-1抑制灰霉菌生长的最适培养基。对菌株CAB-1抑菌物质产生的发酵条件和特性进一步优化和研究表明,,4号培养基的最佳发酵温度为31℃,最佳发酵时间为48 h。抑菌物质稳定性研究结果表明,菌株CAB-1所产的抑菌物质在60℃及其以下具有热稳定性;超声波(100W)处理20 min对抑菌物质的活性没有影响,处理30 min以上抑菌物质的活性显著下降;紫外线照射20 min、30 min、40 min对抑菌物质的活性没有显著影响,处理50 min后其抑菌活性显著降低。菌株CAB-1无菌体培养液在pH值为6、10、11时抑菌活性最高。
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